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媛媛yang新虫 (初入文坛)
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[交流]
农杆菌菌液PCR没有结果 已有6人参与
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第一次菌液PCR，用农杆菌做菌液PCR,菌液1是保存在冰箱中一周，菌液2是新鲜摇的菌，3和4是质粒，结果，1，2，3没有条带，只有4有目的条带，且有很多杂带。目的条带800bp左右。 PCR条件是94℃，5min; 94℃，1min; 61℃，1min; 72℃，2min; 72℃，10min 请问是不是我的PCR条件有问题？请指教！ |
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5楼2011-04-22 09:21:18
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2楼2011-04-20 18:49:57
媛媛yang
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今天重新做了菌液PCR，我把菌液100微升煮了15min，离心取上清，加样1微升，结果加样孔特别的亮，这种是什么情况？为什么每次都有新现象？ 我的体系： 10*PCR Buffer 2.5 10mM dNTP 1 Taq 0.2 10微M 引物1 1 引物2 1 菌液 1 水 18.3 Total 25 我的条件 94 10min 94 1min 61 1min 72 30sec 72 10min 30个循环 目的条带800bp左右，但是煮过的样品在marker最大条带后面有一个条带，marker最大的条带是1500，请问这是怎么回事？这个条带是怎么回事呢？ 请指教！请指教！ |
3楼2011-04-21 18:13:54
媛媛yang
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4楼2011-04-22 00:05:18
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