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weiminhb

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于菌落PCR 已有11人参与

前几天做了一次菌落PCR,菌里有质粒,我是想验证质粒有没有转进去,结果没有扩增出目标条带,以质粒为模板进行对照,有目标条带。这是什么原因呢?这个质粒是低拷贝的,望高人指点。
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tongyanna

金虫 (正式写手)

学习学习啊,呵呵呵
自己的路,自己快乐的走
4楼2010-07-29 19:16:23
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louli

铜虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+2):谢谢交流 2010-07-29 19:35:42
你的描述有点模糊
你的意思是:挑单菌落要的菌液直接PCR没有带是吗?如果这样的话可能是假阳性!
2楼2010-07-29 17:28:56
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weiminhb

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by louli at 2010-07-29 17:28:56:
你的描述有点模糊
你的意思是:挑单菌落要的菌液直接PCR没有带是吗?如果这样的话可能是假阳性!

我是直接从斜面上挑菌做的菌落PCR,没有扩增出目标条带。而以质粒为模板,扩增出了目标条带
3楼2010-07-29 18:08:49
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noheartman

金虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-07-29 19:35:54
菌落PCR如果没有扩增出目的片段,那就是重组质粒没有转进去
5楼2010-07-29 19:20:49
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