24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1754  |  回复: 7

纳兰欣光

新虫 (初入文坛)

[求助] 5'RACE 菌落PCR

最近做5‘RACE ,inner  PCR跑出两条带,一条1000多的,一条100多的,1000多bp的为目的片段,可是切胶回收后转化连接,菌落PCR没有1000多的带,只有100的带,想问一下有经验的前辈们什么原因啊?图1是inner  PCR,图2是菌落PCR



回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

madengyu

禁虫 (小有名气)


西瓜(金币+1): good 2011-10-17 17:11:30
纳兰欣光(金币+2): 2011-11-02 18:41:28
本帖内容被屏蔽

2楼2011-10-12 18:52:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hc1027

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by madengyu at 2011-10-12 18:52:32:
图2是引物二聚体吧!我是用菌液做的PCR,效果很好。

产生楼主那样引物二聚体的原因是什么呢?我以前也遇到过
3楼2011-10-17 10:17:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

imyting

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

是引物二聚体,我每次做都会有一点,但是不会这么亮,可能是切胶回收率太低,可以试试用PCR产物纯化。
悠哉游哉做实验,成兮败兮我随便
4楼2011-10-23 18:49:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wxq999

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

西瓜:编辑内容 2011-10-24 17:51
-------------广告内容-----------------
该虫多次发布广告,为了避免版主刷管理记录的嫌疑,不再每个帖子单独扣分,而是分几次重罚。请自重,勿扰乱论坛的正常交流!

[ Last edited by 西瓜 on 2011-10-24 at 17:51 ]
5楼2011-10-24 17:04:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaohaozi9876

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

很大可能性是你所得到的clony都是空载体

因为你的sample太少  不足以说明其他问题
Onceinamoment,wethinkoneselfgrowup,oneday,wefinallyfound...
6楼2011-10-31 16:53:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

李春晓科研

新虫 (初入文坛)

图2条带应该是引物二聚体,你没P出来。调整一下反应程序或者可能就是没转进去的假阳性。
7楼2011-11-20 14:38:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (小有名气)

本帖仅楼主可见
8楼2014-03-06 23:25:06
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页
相关版块跳转 我要订阅楼主 纳兰欣光 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 山东高校教师考核超级无底线,员工过不下去啦 +4 qut2026 2026-04-09 9/450 2026-04-12 00:54 by qut2026
[考研] 求助调剂,跨调 +11 X十甫寸Y 2026-04-11 11/550 2026-04-11 23:49 by 学zh
[考研] 291分调剂 +5 上岸小莹加油 2026-04-09 6/300 2026-04-11 21:06 by 逆水乘风
[考研] 301求调剂 +6 XYPLR 2026-04-05 9/450 2026-04-11 20:37 by Delta2012
[考研] 343求调剂 +9 王国帅 2026-04-10 9/450 2026-04-11 20:31 by dongdian1
[考研] 296求调剂 +14 汪!?! 2026-04-08 15/750 2026-04-11 20:28 by dongdian1
[考研] 求调剂 +3 胃痉挛累了 2026-04-11 5/250 2026-04-11 14:13 by luhong1990
[考研] 化工求调剂! +35 RichLi_ 2026-04-06 35/1750 2026-04-11 11:02 by zhq0425
[考研] 本科西工大 324求调剂 +4 wysyjs25 2026-04-10 4/200 2026-04-10 20:00 by 来看流星雨10
[考研] 296求调剂 +6 汪!?! 2026-04-08 6/300 2026-04-10 11:02 by mattzhming
[考研] 一志愿 江南大学 085602 化工专硕 338分求调剂 +16 路痴小琪 2026-04-05 16/800 2026-04-10 08:08 by kangsm
[考研] 332,085601求调剂 +12 ydfyh 2026-04-09 14/700 2026-04-09 17:28 by wp06
[考研] 材料工程调剂 +12 小刘同学吖吖 2026-04-06 13/650 2026-04-09 17:07 by luoyongfeng
[考研] 083200 初试305分 求调剂 暂不考虑跨专业 +15 Claireyyyy 2026-04-09 15/750 2026-04-09 16:11 by zhuimr
[考研] 材料与化工专硕306分找合适调剂 +27 沧海轻舟e 2026-04-06 28/1400 2026-04-08 22:06 by wdyheheeh
[考研] 一志愿南京航空航天大学 材料与化工329分求调剂 +11 Mr. Z 2026-04-05 12/600 2026-04-08 16:15 by luoyongfeng
[考研] 259求调剂 +5 就爱吃土豆呀呀 2026-04-07 5/250 2026-04-07 22:40 by JourneyLucky
[考研] 362求调剂一志愿中国石油大学 +4 我要考大 2026-04-06 6/300 2026-04-06 14:11 by 无际的草原
[考研] 302分 085601求调剂推荐 +11 zyx上岸! 2026-04-05 11/550 2026-04-05 22:13 by dongzh2009
[考研] 327求调剂 +4 拾光任染 2026-04-05 4/200 2026-04-05 20:16 by 南航~万老师
信息提示
请填处理意见