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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 挑取单菌落到液体培养基中不长的原因
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s24512453

新虫 (初入文坛)

[求助] 挑取单菌落到液体培养基中不长的原因 已有1人参与

将重组质粒导入大肠杆菌感受态细胞，涂板，过夜培养出现单菌落，接着做菌落pcr，出现正确条带后将对应的单菌落接入液体培养基，amp浓度是50微克每ml，16小时后不长，十个都是这样，之前也是这样做，一般都长
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1楼 2013-10-26 13:42:43
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谢伊莹

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 2013-10-26 20:31:05
amp浓度错了吧，还是单菌落做PCR了，液体培养基里没接上菌？
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2楼2013-10-26 16:11:06
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沙门小rna

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-10-27 17:04:41
接菌正常吗？不是烧坏了吧。amp浓度高一点儿也没太大关系的。除非你那的单菌落上amp失效张出的不是你要的菌。建议接个平板看看还长不长。或者注意你的菌是不是放太久了，活性太低了。那么再加上培养基没配好和抗生素浓度高可能不长，不过两个都出现问题的概率不大啊。
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应助之星就是我~没错。你没有看错~
3楼2013-10-27 11:24:48
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867575969

至尊木虫 (著名写手)

One Piece
lz 是在做基因克隆？
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有些东西因为得不到而变得美好，有些东西因为拥有而变得弥足珍贵！
4楼2013-10-27 11:42:44
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smile901018

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你可以挑取单菌落先在离心管中要1个小时，再做菌落PCR检验，如果检测成功就可以直接吸取菌液摇菌了，这样成功率应该会高一些～希望对你有帮助
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5楼2014-02-15 17:25:14
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