24小时热门版块排行榜    

查看: 2795  |  回复: 4

蓝色泡沫321

银虫 (初入文坛)

[求助] 菌落PCR有目的条带,质粒提取后质量良好,可是质粒PCR却没有目的条带

我提取质粒后跑电泳,条带比5微升 的marker亮一点,然后用15微升体系做质粒pcr,质粒添加量为0.3微升,结果P不出目的基因,这是怎么回事
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

随风飘摇11

木虫 (著名写手)

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-07-04 23:10:59
做好对照才好找原因啊,你这样子简单一说别人也没法给你找到底哪的问题。有没有阳性对照,如果连阳性对照都出问题了,那就是你体系出问题了。如果阳性对照没问题,那就看质粒提取是否有问题。一般菌P高亮的话,只要质粒提取没有问题,那质粒pcr一般是没有问题的

[ 发自小木虫客户端 ]
天道酬勤
2楼2014-07-04 15:50:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蓝色泡沫321

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 随风飘摇11 at 2014-07-04 15:50:10
做好对照才好找原因啊,你这样子简单一说别人也没法给你找到底哪的问题。有没有阳性对照,如果连阳性对照都出问题了,那就是你体系出问题了。如果阳性对照没问题,那就看质粒提取是否有问题。一般菌P高亮的话,只要 ...

阳性对照药怎么做呢,我刚开始做分子实验,还是新手,多多指点啊
3楼2014-07-04 16:16:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

随风飘摇11

木虫 (著名写手)

★ ★
蓝色泡沫321(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-07-05 19:01:11
引用回帖:
3楼: Originally posted by 蓝色泡沫321 at 2014-07-04 16:16:08
阳性对照药怎么做呢,我刚开始做分子实验,还是新手,多多指点啊...

就是用你扩基因时候的东西做模板(含有这个基因的重组载体或者cDNA),目的就是为了排除不是你pcr体系造成的质粒pcr扩不出来。简单的说,要不就是你pcr扩增是少加了东西,要不就是你质粒没有提出来。所以做好对照你才能排除原因

[ 发自小木虫客户端 ]
天道酬勤
4楼2014-07-04 16:33:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

考拉003

新虫 (小有名气)

试试25ul体系,模版加到1ul
不是微生物专业的却进入微生物行业
5楼2014-07-05 04:38:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 蓝色泡沫321 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 纯娱乐,不喜欢勿喷 +5 Tide man 2026-08-04 8/400 2026-08-04 11:43 by everxc
[找工作] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 Ocx3OKOzGU4q 2026-08-03 6/300 2026-08-04 11:36 by MWRYsWbJw4DE
[考研] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 Ocx3OKOzGU4q 2026-08-03 6/300 2026-08-04 11:34 by MWRYsWbJw4DE
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 f1dmPx051StA 2026-08-03 7/350 2026-08-04 09:31 by v1TJC4qJauAB
[博后之家] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 jRl3mE6ddZGq 2026-08-03 5/250 2026-08-04 09:27 by v1TJC4qJauAB
[博后之家] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 9/450 2026-08-04 09:17 by v1TJC4qJauAB
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +5 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 10/500 2026-08-04 09:15 by v1TJC4qJauAB
[基金申请] 系统今天又提示维护了,估计离放榜不远了 +12 winnerche 2026-07-29 16/800 2026-08-04 08:18 by Equinoxhua
[找工作] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 9/450 2026-08-04 07:37 by k7OM8YghWbkC
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 13/650 2026-08-04 07:30 by k7OM8YghWbkC
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 6/300 2026-08-04 06:10 by k7OM8YghWbkC
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 jRl3mE6ddZGq 2026-08-03 6/300 2026-08-04 04:47 by k7OM8YghWbkC
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 7/350 2026-08-04 04:46 by k7OM8YghWbkC
[基金申请] 什么时候能放榜呀? +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
[高分子] UV压敏胶开发 +3 ichall 2026-07-30 5/250 2026-08-03 14:40 by Sunrisepay
[基金申请] 面上再次挂了,太难了,躺也躺不了,倦也卷不过,小学校之殇! +19 低垂的野花 2026-07-31 25/1250 2026-08-03 09:25 by gy116024
[基金申请] 2026年国自然面上资助率 +16 布布和一二 2026-07-30 22/1100 2026-08-03 09:20 by gy116024
[基金申请] 微信指数没变化,科研之友没阅读 +15 wangze12014 2026-07-28 19/950 2026-08-02 20:05 by 蔡棒棒菂
[高分子] HXDI做水性聚氨酯乳液,是不是特别容易出渣 15+3 yuyusuv 2026-07-29 3/150 2026-07-31 09:21 by huizingga
[基金申请] 你们的时间戳变了吗 +3 archvillain 2026-07-30 4/200 2026-07-30 18:53 by levinzhwen
信息提示
请填处理意见