应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 同一个质粒的PCR结果和做出这个质粒的原来的RT-PCR结果不一样，什么原因呢？？
91/1返回列表
查看: 1419  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

haitai2011

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2013-07-09 11:16:02
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jilly

新虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
137167741: 金币+1, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-07-10 21:36:19
haitai2011: 金币+5 2013-07-11 21:01:24
RT-PCR结果和预期的一样吗？
出现这种结果，要是RT-PCR结果和预期的一样的话，有可能质粒是假阳，可用酶切鉴定一下，会不会有目的条带出来，PCR比较容易出现假阳。最准备的鉴定就是测序了
赞一下 回复此楼
2楼2013-07-10 10:38:57
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

haitai2011

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
3楼2013-07-10 21:05:55
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jilly

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
关键是双酶切的小带和你的目的片段大小是不是一样的？不是一样的话，说明质粒是假阳了。再不放心的话，可测序
赞一下 回复此楼
4楼2013-07-11 02:00:23
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

haitai2011

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
5楼2013-07-11 10:33:38
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhouking8758

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
难道片段和质粒发生重组？
我遇到过质粒和E.coli 的基因组发生重组的现象。
可以先测序看看序列。
赞一下 回复此楼
6楼2013-07-11 12:11:46
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

haitai2011

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
7楼2013-07-11 21:00:45
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jilly

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by haitai2011 at 2013-07-10 21:05:55
双酶切的两条带 之和 和质粒的条带一样大，pcr也p亮了，但是就是和RT-PCR 结果不一样的...

双酶切的两条带之和，肯定会和质粒的条带一样
我觉得你这个质粒有九成是假阳性的
赞一下 回复此楼
8楼2013-07-12 08:45:16
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhouking8758

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by haitai2011 at 2013-07-11 10:33:38
和我想要的目的条带不一样呢  差了快1000bp了
但是质粒PCR却P亮了...

质粒PCR的带和预期大小的带相差了1000bp，也有可能是质粒在细菌内增殖过程中发生了缺失。
前面我也说过，有可能是发生了重组。
这些情况我都遇到过。
只有测序才知道差的是哪一段以及其他详细信息。
另外，我不大赞同你的RT过程的问题。
你克隆肯定是RT后再PCR，得到正确长度的片段才进行后续的克隆，所以问题应该在克隆这一步，而不会与RT有关。
最后祝你实验顺利。
赞一下 回复此楼
9楼2013-07-12 10:33:33
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 haitai2011 的主题更新
91/1返回列表
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭