24小时热门版块排行榜    

查看: 1299  |  回复: 8
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

haitai2011

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhouking8758

木虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by haitai2011 at 2013-07-11 10:33:38
和我想要的目的条带不一样呢  差了快1000bp了
但是质粒PCR却P亮了...

质粒PCR的带和预期大小的带相差了1000bp,也有可能是质粒在细菌内增殖过程中发生了缺失。
前面我也说过,有可能是发生了重组。
这些情况我都遇到过。
只有测序才知道差的是哪一段以及其他详细信息。
另外,我不大赞同你的RT过程的问题。
你克隆肯定是RT后再PCR,得到正确长度的片段才进行后续的克隆,所以问题应该在克隆这一步,而不会与RT有关。
最后祝你实验顺利。
9楼2013-07-12 10:33:33
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

jilly

新虫 (小有名气)


★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
137167741: 金币+1, 小木虫交流,共同进步~~ 2013-07-10 21:36:19
haitai2011: 金币+5 2013-07-11 21:01:24
RT-PCR结果和预期的一样吗?
出现这种结果,要是RT-PCR结果和预期的一样的话,有可能质粒是假阳,可用酶切鉴定一下,会不会有目的条带出来,PCR比较容易出现假阳。最准备的鉴定就是测序了
2楼2013-07-10 10:38:57
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

haitai2011

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

3楼2013-07-10 21:05:55
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jilly

新虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
关键是双酶切的小带和你的目的片段大小是不是一样的?不是一样的话,说明质粒是假阳了。再不放心的话,可测序
4楼2013-07-11 02:00:23
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 274求调剂 +5 时间点 2026-03-13 5/250 2026-03-17 07:34 by 热情沙漠
[考研] 0703化学336分求调剂 +3 zbzihdhd 2026-03-15 4/200 2026-03-16 23:52 by zbzihdhd
[考研] 286求调剂 +3 lemonzzn 2026-03-16 5/250 2026-03-16 20:43 by lemonzzn
[考研] 290求调剂 +5 孔志浩 2026-03-12 10/500 2026-03-16 09:01 by 余晖&
[考研] 290求调剂 +4 @将就将就看 2026-03-10 8/400 2026-03-14 14:23 by 千千运气
[考研] 学硕285求调剂 +13 Wisjxn 2026-03-12 46/2300 2026-03-14 10:33 by JourneyLucky
[考研] 330求调剂 +3 ?酱给调剂跪了 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:13 by JourneyLucky
[考研] 271求调剂 +10 生如夏花… 2026-03-11 10/500 2026-03-14 00:35 by 卖报员小雨
[考研] 321求调剂 +3 CUcat 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:25 by JourneyLucky
[考研] b区环境工程求调剂 +4 Maps1 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:23 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +6 邱gl 2026-03-12 7/350 2026-03-13 23:24 by 邱gl
[考研] 332求调剂 +3 zjy101327 2026-03-11 6/300 2026-03-13 22:48 by JourneyLucky
[考研] 336求调剂 +6 Iuruoh 2026-03-11 6/300 2026-03-13 22:06 by JourneyLucky
[考研] 四川大学085601材料工程专硕 初试294求调剂 +4 祝我们好在冬天 2026-03-11 4/200 2026-03-13 21:39 by peike
[考研] 329求调剂 +3 miaodesi 2026-03-12 4/200 2026-03-13 20:53 by 18595523086
[考研] 求调剂 +7 18880831720 2026-03-11 7/350 2026-03-13 16:10 by JourneyLucky
[考研] 工科278分求调剂 +5 周慢热啊 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:49 by JourneyLucky
[考研] 化工学硕306求调剂 +9 42838695 2026-03-12 9/450 2026-03-13 10:16 by houyaoxu
[考研] 333求调剂 +3 152697 2026-03-12 4/200 2026-03-13 07:08 by Iveryant
[考研] 哈工大材料324求调剂 +6 闫旭东 2026-03-10 8/400 2026-03-10 22:49 by 星空星月
信息提示
请填处理意见