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limeiliang

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c3024034

银虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
如果你想将TTT为TCG,可以设计一条引物将其同时突变,没问题的 ,相差几个的碱基都可以设计在同一条引物上的
2楼2012-06-27 10:57:48
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genegop

木虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以试试QuikChange® Multi Site-Directed Mutagenesis,https://www.google.com.hk/search ... biw=960&bih=523
4楼2012-06-27 12:30:31
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ilxly

木虫 (小有名气)


★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-06-27 14:56:29
有专门做点突变的酶或者试剂盒
比如quick change kit 和KOD Plus PCR酶
做起来很快的 比普通的PCR还要简单
5楼2012-06-27 14:08:32
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ilxly

木虫 (小有名气)


还有就是你要多次点突变载体上的目的基因后,可以再次把这段基因双酶切下来连接到初始载体上就一切OK了,防止载体上序列出问题
6楼2012-06-27 14:10:15
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easonyshen

银虫 (小有名气)


★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-06-28 15:48:45
quikchange multi是这种问题最快最方便的解决法, 用他们提供的网络程序设计引物,基本每次反应都没什么问题。 而且Quikchange是在整个质粒上突变,就省去了酶切和连接的步骤。
7楼2012-06-28 04:52:00
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limeiliang

禁虫 (正式写手)

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8楼2012-07-01 09:20:19
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limeiliang

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9楼2012-07-01 09:21:41
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limeiliang

禁虫 (正式写手)

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10楼2012-07-01 09:22:03
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艰苦温度

新虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
10楼: Originally posted by limeiliang at 2012-07-01 09:22:03
我想一次突变好几个分散的碱基 行吗 有做过没有啊...

我最近 也在做点突变,一次需要变两个碱基,中间间隔30bp,可以在一条引物上设计两个点突变吗?你做个这种类似的实验吗?或者有前辈路过吗?求指导!
11楼2014-05-28 23:19:33
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2012-06-27 11:38  
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