24小时热门版块排行榜    

查看: 1496  |  回复: 5

yjwjy

木虫 (小有名气)

凡人

[求助] RT-PCR结果分析求助

同一个引物,做RT-PCR在三个不同的材料里面扩增出这个结果,第一个材料有两条带,其他两个材料只有一条带,怎么解释?

11.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

平平淡淡挺好!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yjwjy: 金币+1, 有帮助, 谢谢回复!! 2012-10-27 08:43:52
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-10-27 15:54:06
你的材料是真核还是原核生物的?你引物怎么设计的,扩增片段在基因组DNA是否包含内含子?觉得象是第一个RNA样品有基因组DNA污染。
2楼2012-10-27 07:10:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yjwjy

木虫 (小有名气)

凡人

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-10-27 07:10:29
你的材料是真核还是原核生物的?你引物怎么设计的,扩增片段在基因组DNA是否包含内含子?觉得象是第一个RNA样品有基因组DNA污染。

谢谢!!但是这个材料用其他引物扩增的时候只有一条引物,而且如果扩增片段在基因组DNA有内含子的话,用DNA扩增出来的片段应该比cDNA中的目标片段大才对啊!!
平平淡淡挺好!
3楼2012-10-27 08:42:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
yjwjy: 金币+4, ★★★很有帮助, 可以去试试! 2012-10-28 08:03:32
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-10-28 17:41:16
引用回帖:
3楼: Originally posted by yjwjy at 2012-10-27 08:42:40
谢谢!!但是这个材料用其他引物扩增的时候只有一条引物,而且如果扩增片段在基因组DNA有内含子的话,用DNA扩增出来的片段应该比cDNA中的目标片段大才对啊!!...

所以我问一下具体的材料及引物的设计以排除是否是基因组DNA的污染,你可以用这对引物把基因组DNA也P一下。其他引物P不出基因组带也不一定不是DNA污染问题,因为如果DNase消化不完全会留下不同的DNA残片,有些基因能P出来,有些就P不出来。还有根据你说的,你的图片是放反了吗,难道说上面的那条带是小分子量的?
4楼2012-10-28 02:52:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yjwjy

木虫 (小有名气)

凡人

引用回帖:
4楼: Originally posted by cicelyzh at 2012-10-28 02:52:36
所以我问一下具体的材料及引物的设计以排除是否是基因组DNA的污染,你可以用这对引物把基因组DNA也P一下。其他引物P不出基因组带也不一定不是DNA污染问题,因为如果DNase消化不完全会留下不同的DNA残片,有些基因能 ...

是的,不好意思,就是放反的,点样孔在西面,呵呵。通过和别人交流,是不是可以考虑可变剪切的情况啊?
平平淡淡挺好!
5楼2012-10-28 07:46:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
yjwjy: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 谢谢了! 2012-11-02 14:41:01
引用回帖:
5楼: Originally posted by yjwjy at 2012-10-28 07:46:37
是的,不好意思,就是放反的,点样孔在西面,呵呵。通过和别人交流,是不是可以考虑可变剪切的情况啊?...

如果排除了样品的问题的话,有可能是可变剪接。
6楼2012-10-28 09:19:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yjwjy 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703化学调剂 +10 妮妮ninicgb 2026-03-15 14/700 2026-03-19 22:59 by 学员8dgXkO
[考研] 0817 化学工程 299分求调剂 有科研经历 有二区文章 +18 rare12345 2026-03-18 18/900 2026-03-19 22:36 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿南京理工大学085701资源与环境302分求调剂 +3 葵梓卫队 2026-03-18 5/250 2026-03-19 19:35 by 给你你注意休息
[考研] 复试调剂 +4 z1z2z3879 2026-03-14 6/300 2026-03-19 17:18 by fei626-918
[考研] 321求调剂 +8 何润采123 2026-03-18 10/500 2026-03-19 16:46 by 何润采123
[考博] 东华理工大学化材专业26届硕士博士申请 +8 zlingli 2026-03-13 8/400 2026-03-19 16:32 by 轻松不少随
[考研] 招收调剂硕士 +4 lidianxing 2026-03-19 10/500 2026-03-19 16:05 by 余麟余
[考研] 085600材料与化工调剂 324分 +10 llllkkkhh 2026-03-18 12/600 2026-03-19 14:33 by llllkkkhh
[考研] 287求调剂 +3 晨昏线与星海 2026-03-19 4/200 2026-03-19 12:32 by peike
[考研] 274求调剂 +6 S.H1 2026-03-18 6/300 2026-03-19 09:34 by 花店相见
[考研] 085410人工智能专硕317求调剂(0854都可以) +3 xbxudjdn 2026-03-18 3/150 2026-03-18 22:14 by zhq0425
[考研] 298-一志愿中国农业大学-求调剂 +7 手机用户 2026-03-17 7/350 2026-03-18 14:34 by vgtyfty
[考研] 304求调剂 +12 小熊joy 2026-03-14 13/650 2026-03-18 12:34 by Linda Hu
[考研] 环境工程调剂 +8 大可digkids 2026-03-16 8/400 2026-03-18 09:36 by zhukairuo
[考研] 265求调剂 +3 梁梁校校 2026-03-17 3/150 2026-03-18 09:12 by zhukairuo
[考研] 277调剂 +5 自由煎饼果子 2026-03-16 6/300 2026-03-17 19:26 by 李leezz
[硕博家园] 湖北工业大学 生命科学与健康学院-课题组招收2026级食品/生物方向硕士 +3 1喜春8 2026-03-17 5/250 2026-03-17 17:18 by ber川cool子
[考研] 326求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-15 3/150 2026-03-16 07:33 by Iveryant
[考研] 求老师收留调剂 +4 jiang姜66 2026-03-14 5/250 2026-03-15 20:11 by Winj1e
[考研] 0856专硕279求调剂 +5 加油加油!? 2026-03-15 5/250 2026-03-15 11:58 by 2020015
信息提示
请填处理意见