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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】有关qRT-PCR的问题
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cofe

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】有关qRT-PCR的问题 已有5人参与

paper要求用qRT-PCR来表述过量表达株系某基因的表达量，请问用相对含量还是绝对拷贝数比较好？能否推荐一篇已发表的文章给我参考参考。
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1楼 2010-05-31 15:10:35
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
cofe(金币+1): 2010-05-31 16:40:25
cofe(金币+1): 2010-06-05 21:22:40
一般这种情况是做相对定量，绝对定量用于检测，比如病毒、细菌感染量的检测。我是做动物的，文章就不推荐了
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2楼2010-05-31 16:20:11
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peiliangshu

铜虫 (小有名气)
cofe(金币+1): 2010-05-31 16:40:34
cofe(金币+1): 2010-06-05 21:22:53
使用相对定量就可以了
但是要有标准品才行
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3楼2010-05-31 16:33:36
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by peiliangshu at 2010-05-31 16:33:36:
使用相对定量就可以了
但是要有标准品才行

相对定量，不是用内参吗？标准品是怎么回事？
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4楼2010-05-31 16:48:22
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cofe

金虫 (小有名气)
我想他说的标准品就是内参。
引用回帖:
Originally posted by yujiaping1 at 2010-05-31 16:48:22:


相对定量，不是用内参吗？标准品是怎么回事？

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5楼2010-05-31 16:59:29
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peiliangshu

铜虫 (小有名气)
★
lstt09nk(金币+1):感谢交流~~ 2010-06-04 17:27:04
标准品一般是已知浓度的质粒
可以去生物公司或中检所购买
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6楼2010-06-04 17:26:03
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匿名

用户注销 (著名写手)
cofe(金币+1): 2010-06-05 21:23:05
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7楼2010-06-04 20:05:24
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cofe

金虫 (小有名气)
我说的是用相对定量的qRT-PCR来确认是过量表达株系的文章，这几天还真没找到这样的文章，类似的结果大多用半定量的RT-PCR来表示。可审稿人偏要我用qRT-PCR表示。
麻烦您推荐一篇。
引用回帖:
Originally posted by 彬心玉壶 at 2010-06-04 20:05:24:
相对定量，

用内参，一些本底表达的管家基因，

文章一搜一大堆。你应该会！

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8楼2010-06-05 21:28:39
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ben1147

木虫 (正式写手)
cofe(金币+1):4 2010-06-06 13:26:03
引用回帖:
Originally posted by cofe at 2010-06-05 21:28:39:
我说的是用相对定量的qRT-PCR来确认是过量表达株系的文章，这几天还真没找到这样的文章，类似的结果大多用半定量的RT-PCR来表示。可审稿人偏要我用qRT-PCR表示。
麻烦您推荐一篇。

现在半定量已经不能满足很多审稿人的要求了，不但是做一般的表达分析要定量，就连过表达转基因株系的确定也要有定量数据，用来证明过表达的程度和引起效应程度之间的相关性，这样的文章确实也很多了，不应该没有看到的

比如下面这篇
Galactinol and raffinose as a novel function to protect plants from oxidative damage

http://www.plantphysiol.org/cgi/content/abstract/147/3/1251
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9楼2010-06-05 22:24:07
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匿名

用户注销 (著名写手)
cofe(金币+1):1 2010-06-06 13:26:21
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10楼2010-06-06 02:45:45
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