24小时热门版块排行榜    

查看: 1559  |  回复: 8

haitai2011

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jilly

新虫 (小有名气)


★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
137167741: 金币+1, 小木虫交流,共同进步~~ 2013-07-10 21:36:19
haitai2011: 金币+5 2013-07-11 21:01:24
RT-PCR结果和预期的一样吗?
出现这种结果,要是RT-PCR结果和预期的一样的话,有可能质粒是假阳,可用酶切鉴定一下,会不会有目的条带出来,PCR比较容易出现假阳。最准备的鉴定就是测序了
2楼2013-07-10 10:38:57
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

haitai2011

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

3楼2013-07-10 21:05:55
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jilly

新虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
关键是双酶切的小带和你的目的片段大小是不是一样的?不是一样的话,说明质粒是假阳了。再不放心的话,可测序
4楼2013-07-11 02:00:23
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

haitai2011

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

5楼2013-07-11 10:33:38
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhouking8758

木虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
难道片段和质粒发生重组?
我遇到过质粒和E.coli 的基因组发生重组的现象。
可以先测序看看序列。
6楼2013-07-11 12:11:46
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

haitai2011

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

7楼2013-07-11 21:00:45
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jilly

新虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by haitai2011 at 2013-07-10 21:05:55
双酶切的两条带 之和 和质粒的条带一样大,pcr也p亮了,但是就是和RT-PCR 结果不一样的...

双酶切的两条带之和,肯定会和质粒的条带一样
我觉得你这个质粒有九成是假阳性的
8楼2013-07-12 08:45:16
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhouking8758

木虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by haitai2011 at 2013-07-11 10:33:38
和我想要的目的条带不一样呢  差了快1000bp了
但是质粒PCR却P亮了...

质粒PCR的带和预期大小的带相差了1000bp,也有可能是质粒在细菌内增殖过程中发生了缺失。
前面我也说过,有可能是发生了重组。
这些情况我都遇到过。
只有测序才知道差的是哪一段以及其他详细信息。
另外,我不大赞同你的RT过程的问题。
你克隆肯定是RT后再PCR,得到正确长度的片段才进行后续的克隆,所以问题应该在克隆这一步,而不会与RT有关。
最后祝你实验顺利。
9楼2013-07-12 10:33:33
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 haitai2011 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +4 kulium 2026-08-21 5/250 2026-08-21 17:45 by Equinoxhua
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 10/500 2026-08-21 17:32 by chengyan1220
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 14/700 2026-08-21 16:51 by applepetty
[基金申请] 让我中一个面上吧! +11 大萍1987 2026-08-20 13/650 2026-08-21 14:48 by 20120902066
[基金申请] 人气不行了 +7 fansofjerry 2026-08-21 7/350 2026-08-21 14:13 by Vivilian
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 什么时候开奖? +7 CrisMessi 2026-08-18 7/350 2026-08-21 12:15 by weiyin
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +15 archvillain 2026-08-15 27/1350 2026-08-21 11:32 by tim76
[基金申请] 科研孤儿太难了 +15 我4大白菜 2026-08-20 16/800 2026-08-21 11:07 by yming1319
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 13/650 2026-08-21 08:30 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
信息提示
请填处理意见