24小时热门版块排行榜    

查看: 2805  |  回复: 4

蓝色泡沫321

银虫 (初入文坛)

[求助] 菌落PCR有目的条带,质粒提取后质量良好,可是质粒PCR却没有目的条带

我提取质粒后跑电泳,条带比5微升 的marker亮一点,然后用15微升体系做质粒pcr,质粒添加量为0.3微升,结果P不出目的基因,这是怎么回事
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

随风飘摇11

木虫 (著名写手)

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-07-04 23:10:59
做好对照才好找原因啊,你这样子简单一说别人也没法给你找到底哪的问题。有没有阳性对照,如果连阳性对照都出问题了,那就是你体系出问题了。如果阳性对照没问题,那就看质粒提取是否有问题。一般菌P高亮的话,只要质粒提取没有问题,那质粒pcr一般是没有问题的

[ 发自小木虫客户端 ]
天道酬勤
2楼2014-07-04 15:50:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蓝色泡沫321

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 随风飘摇11 at 2014-07-04 15:50:10
做好对照才好找原因啊,你这样子简单一说别人也没法给你找到底哪的问题。有没有阳性对照,如果连阳性对照都出问题了,那就是你体系出问题了。如果阳性对照没问题,那就看质粒提取是否有问题。一般菌P高亮的话,只要 ...

阳性对照药怎么做呢,我刚开始做分子实验,还是新手,多多指点啊
3楼2014-07-04 16:16:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

随风飘摇11

木虫 (著名写手)

★ ★
蓝色泡沫321(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-07-05 19:01:11
引用回帖:
3楼: Originally posted by 蓝色泡沫321 at 2014-07-04 16:16:08
阳性对照药怎么做呢,我刚开始做分子实验,还是新手,多多指点啊...

就是用你扩基因时候的东西做模板(含有这个基因的重组载体或者cDNA),目的就是为了排除不是你pcr体系造成的质粒pcr扩不出来。简单的说,要不就是你pcr扩增是少加了东西,要不就是你质粒没有提出来。所以做好对照你才能排除原因

[ 发自小木虫客户端 ]
天道酬勤
4楼2014-07-04 16:33:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

考拉003

新虫 (小有名气)

试试25ul体系,模版加到1ul
不是微生物专业的却进入微生物行业
5楼2014-07-05 04:38:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 蓝色泡沫321 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 澳大利亚 Murdoch University 全奖博士招生(3个名额)地质化工冶金领域 +63 AI8RaGaPaSCR 2026-08-07 66/3300 2026-08-14 06:15 by fhFebuBRaofp
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +12 医学老男孩 2026-08-13 30/1500 2026-08-14 06:02 by zyjwdhcs
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 12/600 2026-08-13 23:20 by iwuli
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +3 启萌科技 2026-08-12 11/550 2026-08-13 22:57 by 启萌科技
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 28/1400 2026-08-13 17:51 by 医学老男孩
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +22 Lanmanbaby 2026-08-09 36/1800 2026-08-12 22:50 by sdfapple719
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +7 布布和一二 2026-08-10 10/500 2026-08-12 09:12 by 布布和一二
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
信息提示
请填处理意见