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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » PCR后可以看到目的条带，但为什么目的条带上方有弥散？
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cynthia91083

银虫 (初入文坛)

[求助] PCR后可以看到目的条带，但为什么目的条带上方有弥散？ 已有5人参与

各位高手：
      请问PCR后，可以看见目的条带，但目的条带上方有很长且亮的弥散带，请问是什么原因？我不知道从哪里分析起啊？在线求解,谢谢。

PCR后可以看到目的条带，但为什么目的条带上方有弥散？
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1楼 2014-04-14 17:35:56
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yuren2009

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一般上样量太多、电压过高，PCR产物降解或不纯都有可能导致拖尾。你的图似乎样没上号。
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学习使你立于不败之地
2楼2014-04-14 18:09:45
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
PCR产物不纯，非特异带很多啊

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2014-04-14 18:23:02
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cynthia91083

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yuren2009 at 2014-04-14 18:09:45
一般上样量太多、电压过高，PCR产物降解或不纯都有可能导致拖尾。你的图似乎样没上号。

请问有可能是我换成了新配的电泳液的原因么？
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4楼2014-04-14 18:52:24
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cynthia91083

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-04-14 18:23:02
PCR产物不纯，非特异带很多啊

我跑的是一个变异区，会有可能有几条带的出现的。我现在纠结的是目的条带上面的一大片弥散
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5楼2014-04-14 18:54:40
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谁呀你是谁呀

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
感觉是飘样了 loading buffer 加少了 样品没有沉下去 或者胶孔太浅了 样品跑出来了 电泳系统应该没问题 不然marker也会散 嗯 在不确定就重新p 退火温度升高3-5
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等等等等
6楼2014-04-14 19:16:42
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yuren2009

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by cynthia91083 at 2014-04-14 18:52:24
请问有可能是我换成了新配的电泳液的原因么？...

关系似乎不大，你的marker不是好好的么？应该跟样品有关。
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学习使你立于不败之地
7楼2014-04-14 19:47:44
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sf19870429

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

是做完PCR后就跑的胶么？
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8楼2014-04-18 13:55:53
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亦逐日

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感觉点样量太多了，你少点一些试试
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道可道，非常道
9楼2014-12-26 11:46:13
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