应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 菌落PCR有目的条带，质粒提取后质量良好，可是质粒PCR却没有目的条带
51/1返回列表
查看: 2843  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

蓝色泡沫321

银虫 (初入文坛)

[求助] 菌落PCR有目的条带，质粒提取后质量良好，可是质粒PCR却没有目的条带

我提取质粒后跑电泳，条带比5微升 的marker亮一点，然后用15微升体系做质粒pcr，质粒添加量为0.3微升，结果P不出目的基因，这是怎么回事
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-07-04 14:26:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

随风飘摇11

木虫 (著名写手)
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-07-04 23:10:59
做好对照才好找原因啊，你这样子简单一说别人也没法给你找到底哪的问题。有没有阳性对照，如果连阳性对照都出问题了，那就是你体系出问题了。如果阳性对照没问题，那就看质粒提取是否有问题。一般菌P高亮的话，只要质粒提取没有问题，那质粒pcr一般是没有问题的

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
天道酬勤
2楼2014-07-04 15:50:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蓝色泡沫321

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 随风飘摇11 at 2014-07-04 15:50:10
做好对照才好找原因啊，你这样子简单一说别人也没法给你找到底哪的问题。有没有阳性对照，如果连阳性对照都出问题了，那就是你体系出问题了。如果阳性对照没问题，那就看质粒提取是否有问题。一般菌P高亮的话，只要 ...

阳性对照药怎么做呢，我刚开始做分子实验，还是新手，多多指点啊
赞一下 回复此楼
3楼2014-07-04 16:16:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

随风飘摇11

木虫 (著名写手)
★ ★
蓝色泡沫321(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-07-05 19:01:11
引用回帖:
3楼: Originally posted by 蓝色泡沫321 at 2014-07-04 16:16:08
阳性对照药怎么做呢，我刚开始做分子实验，还是新手，多多指点啊...

就是用你扩基因时候的东西做模板（含有这个基因的重组载体或者cDNA），目的就是为了排除不是你pcr体系造成的质粒pcr扩不出来。简单的说，要不就是你pcr扩增是少加了东西，要不就是你质粒没有提出来。所以做好对照你才能排除原因

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
天道酬勤
4楼2014-07-04 16:33:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

考拉003

新虫 (小有名气)
试试25ul体系，模版加到1ul
赞一下 回复此楼
不是微生物专业的却进入微生物行业
5楼2014-07-05 04:38:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 蓝色泡沫321 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 5BDX0d0WFp7t 2026-09-15 4/200 2026-09-17 16:29 by 0ngsZVSCTS7z
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 0pYnUiPDfdnk 2026-09-14 4/200 2026-09-17 14:15 by ObVzqQQh1rrE
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 5/250 2026-09-17 14:05 by ObVzqQQh1rrE
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 23jxep3nCNZb 2026-09-14 4/200 2026-09-17 13:51 by ObVzqQQh1rrE
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 23jxep3nCNZb 2026-09-14 5/250 2026-09-17 13:29 by ObVzqQQh1rrE
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-17 13:05 by ObVzqQQh1rrE
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 3/150 2026-09-17 05:14 by k06BKNblrGRH
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 4/200 2026-09-17 04:26 by k06BKNblrGRH
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +7 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 7/350 2026-09-16 14:36 by i3KBRD19ERkG
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 6/300 2026-09-16 03:50 by DgNGHc3h5tPl
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-16 02:50 by DgNGHc3h5tPl
[找工作] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 3/150 2026-09-16 02:38 by DgNGHc3h5tPl
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +7 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 8/400 2026-09-16 02:23 by DgNGHc3h5tPl
[考博] 申博发邮件 +4 Lmengk 2026-09-15 4/200 2026-09-16 00:05 by 木心想继续深造
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-15 16:59 by CgyNCDVNhGVg
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 7/350 2026-09-15 16:47 by CgyNCDVNhGVg
[考博] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +7 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 7/350 2026-09-15 16:23 by CgyNCDVNhGVg
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-15 08:02 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-15 07:50 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-15 05:38 by 5BDX0d0WFp7t
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭