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btx362237729

金虫 (正式写手)

[交流] 质粒提取琼脂糖电泳的3个条带,到底每条是什么?已有8人参与


这里说快慢顺序分别是超螺旋 线性DNA  开环DNA、、、

但是有人说用碱裂解法提取质粒是不会有线性DNA的(见2楼)
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=3393672

说分别应该是超螺旋、开环和复制中间体(即没有复制完全的两个质粒连在了一起

到底应该是什么啊。。。。来个权威点的
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天使托

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T.Shen

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
amisking(金币+2, EPI+1): 鼓励应助 2011-07-18 13:10:30
最快的是超螺旋,其次是线性DNA,最慢的是开环DNA;
其实我们提取质粒的时候常见的是两条带:超螺旋和开环DNA,但是个人觉得线性的DNA也是存在的,只是量很少而已,因为质粒如果变成线性的话,其就不能进行正常复制,就会慢慢降解掉。所以提取出来的量就会很少,但是我觉得是存在的。
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
7楼2011-07-18 12:58:11
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源睿

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
按AXYGEN提取试剂盒的说明书说的主带是质粒的超螺旋结构,在主带上面通常有1-3条电泳更慢的条带,一般认为是开环质粒和质粒二聚体(或不同的交联形式),有时偶尔会有在超螺旋条带前面出现微弱的称为“不可逆变性质粒”条带
我相信我们能
14楼2011-07-18 22:50:51
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普通回帖

zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
应该是质粒的单体、二聚体和三聚体形式。
2楼2011-07-18 09:24:07
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likewind_z

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
我还是相信第一种,因为我记得我以前看过80年代的文献,那时候提质粒然后还用电镜观察来着
3楼2011-07-18 09:29:38
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btx362237729

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by likewind_z at 2011-07-18 09:29:38:
我还是相信第一种,因为我记得我以前看过80年代的文献,那时候提质粒然后还用电镜观察来着

哎 就质粒这小东西都有分歧
人生最黑暗的时光终于过去了
4楼2011-07-18 09:34:18
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clbb1030

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
我个人认为是质粒三种不同状态。以前我大多只能跑出2条带,偶尔出3条。
5楼2011-07-18 09:56:34
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btx362237729

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by clbb1030 at 2011-07-18 09:56:34:
我个人认为是质粒三种不同状态。以前我大多只能跑出2条带,偶尔出3条。

哪三种不同的状态啊。。。。。。。。。
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6楼2011-07-18 10:09:12
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btx362237729

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2011-07-18 12:58:11:
最快的是超螺旋,其次是线性DNA,最慢的是开环DNA;
其实我们提取质粒的时候常见的是两条带:超螺旋和开环DNA,但是个人觉得线性的DNA也是存在的,只是量很少而已,因为质粒如果变成线性的话,其就不能进行正常复 ...

谢谢回答 但是有人说碱裂解法提取质粒不会有线性的质粒
人生最黑暗的时光终于过去了
8楼2011-07-18 13:03:43
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modest1986

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
好像是超螺旋,nick和开环
这个人很懒,什么都没留下。
9楼2011-07-18 13:12:08
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likewind_z

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
关键是那个帖子里lxj341401大侠讲了一大通,最后谈到三种状态,其中这个没有线性质粒这个问题颠覆了我们的以往认知,但是没有引用文献, 所以让lz郁闷了,大家谁知道文献来源?
10楼2011-07-18 13:36:27
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