应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 定量PCR跑出来没有CT值，怎么回事
121/2返回列表12下一页
查看: 7008  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

随风飘摇11

木虫 (著名写手)

[求助] 定量PCR跑出来没有CT值，怎么回事 已有4人参与

跑了两个样做标准曲线，跑完结果第一个样就没有检测到CT值，怎么回事？两个样品就引物不一样，其他都一样啊。刚接触定量PCR，求教
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
天道酬勤
1楼 2015-05-03 13:38:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
随风飘摇11: 金币+2, ★有帮助 2015-05-03 18:13:24
首先你要确认你的这对引物是否适合在你这个反映程序中扩增，可用凝胶电泳检测引物的特异性、退火温度等等。如果引物合适，再确认这个探针是否在所测样品中有表达，如果本身就没有表达或者表达量极低，也是无法检测的。祝好运。
赞一下 回复此楼
2楼2015-05-03 15:53:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

随风飘摇11

木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-05-03 15:53:10
首先你要确认你的这对引物是否适合在你这个反映程序中扩增，可用凝胶电泳检测引物的特异性、退火温度等等。如果引物合适，再确认这个探针是否在所测样品中有表达，如果本身就没有表达或者表达量极低，也是无法检测的 ...

怎么检测引物是否合适？定量的引物也可能用来做普通的PCR扩增吗？

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
天道酬勤
3楼2015-05-03 18:13:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晞朔

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 随风飘摇11 at 2015-05-03 18:13:10
怎么检测引物是否合适？定量的引物也可能用来做普通的PCR扩增吗？
...

可以。用凝胶电泳就可以
赞一下 回复此楼
4楼2015-05-03 18:14:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

随风飘摇11

木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-05-03 18:14:53
可以。用凝胶电泳就可以...

老实说，定量引物做半定量都不行，半定量不就是普通PCR吗？你这样做过吗

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
天道酬勤
5楼2015-05-03 18:19:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晞朔

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 随风飘摇11 at 2015-05-03 18:19:06
老实说，定量引物做半定量都不行，半定量不就是普通PCR吗？你这样做过吗
...

片段多大？？
回复此楼
6楼2015-05-03 18:20:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

随风飘摇11

木虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 晞朔 at 2015-05-03 18:20:08
片段多大？？...

基因全长1700bp。但不是说定量的引物只有80-400bp设计的吗？引物是我老师设计的

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
天道酬勤
7楼2015-05-03 18:32:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晞朔

金虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 随风飘摇11 at 2015-05-03 18:32:32
基因全长1700bp。但不是说定量的引物只有80-400bp设计的吗？引物是我老师设计的
...

是可以检测的。用琼脂糖凝胶电泳检测下
赞一下 回复此楼
8楼2015-05-03 19:36:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

violin0313

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可能是定量程序没设定对，完全按照你跑出CT值的那个程序跑
赞一下 回复此楼
9楼2015-05-04 11:17:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

随风飘摇11

木虫 (著名写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by violin0313 at 2015-05-04 11:17:51
可能是定量程序没设定对，完全按照你跑出CT值的那个程序跑

两个程序一样的，一块儿跑的

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
天道酬勤
10楼2015-05-04 12:04:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 随风飘摇11 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 5/250 2026-09-17 02:02 by Tql5LQhh5rLK
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 7/350 2026-09-17 02:02 by Tql5LQhh5rLK
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +6 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 6/300 2026-09-17 01:50 by Tql5LQhh5rLK
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 vZfe6xYu34yj 2026-09-14 4/200 2026-09-16 22:40 by Tql5LQhh5rLK
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 3/150 2026-09-16 21:26 by MHf40yA0Uhyb
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 23jxep3nCNZb 2026-09-14 4/200 2026-09-16 21:03 by MHf40yA0Uhyb
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 23jxep3nCNZb 2026-09-14 4/200 2026-09-16 20:50 by MHf40yA0Uhyb
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-16 19:15 by rRvxEj3zorCy
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 3/150 2026-09-16 18:39 by rRvxEj3zorCy
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-16 17:03 by i3KBRD19ERkG
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-16 14:39 by i3KBRD19ERkG
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组｜2027级博士研究生招生公告 +7 水士口 2026-09-16 8/400 2026-09-16 13:47 by kkklens
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 4/200 2026-09-16 07:48 by i0IGWqQuchto
[考研] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 4/200 2026-09-16 06:36 by LH5NkK5Ud4bh
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-16 05:27 by LH5NkK5Ud4bh
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 6/300 2026-09-16 03:50 by DgNGHc3h5tPl
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 0pYnUiPDfdnk 2026-09-14 3/150 2026-09-15 19:35 by CgyNCDVNhGVg
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-15 07:50 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-15 07:02 by 5BDX0d0WFp7t
[考博] 西北工业大学材料学院电化学传感与催化课题组招收2027年推免研究生、博士生、博士后 +3 马方园 2026-09-10 4/200 2026-09-14 09:29 by Chem张zz
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭