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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求助内参基因扩不出来的问题？
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wzc4884

金虫 (正式写手)

[求助] 求助内参基因扩不出来的问题？ 已有3人参与

大家好，最近在做荧光定量的PCR，扩增的是细菌，看熔解曲线的话，内参应该没有问题，但是就是没有CT值，不知道是怎么回事？希望各位大牛释惑，因为纠结很久了一直找不出来原因，谢谢大家！
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1楼 2014-03-31 19:27:46
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跳舞的骆驼

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2014-03-31 21:44:19
可能是设置的问题！仔细检查一下。
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2楼2014-03-31 20:41:19
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-03-31 21:44:12
你看看你的循环延伸时间长度够不够。再与其他实验的设置比对一下看看是否出问题。
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hehe
3楼2014-03-31 20:45:38
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芳草双木

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

楼主的问题解决了吗，最近我也遇到了这样的问题，同求啊？？？
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4楼2014-04-13 09:31:52
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芳草双木

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

问过老师了，是内参丰度太高，内参表达太多，可以把内参做个倍比稀释，这样就可以找到合适的浓度了
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5楼2014-04-16 09:11:11
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wzc4884

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 芳草双木 at 2014-04-16 09:11:11
问过老师了，是内参丰度太高，内参表达太多，可以把内参做个倍比稀释，这样就可以找到合适的浓度了

谢谢了，确实是这样子的，
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6楼2014-04-18 16:45:57
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请叫我悠悠

新虫 (初入文坛)
能告诉我一下 细菌选什么内参吗？16sRNA是通用的吗

发自小木虫IOS客户端
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7楼2017-06-02 13:15:20
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我也想学好pcr

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 芳草双木 at 2014-04-16 09:11:11
问过老师了，是内参丰度太高，内参表达太多，可以把内参做个倍比稀释，这样就可以找到合适的浓度了

是把内参引物浓度倍比稀释吗？

发自小木虫Android客户端
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8楼2017-06-03 21:31:06
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