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反转录后用cDNA做模板扩不出目的基因怎么办???
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各位大侠急急求助啊! 最近小女子做分子实验颇为不顺!扩出来一个1800多的CDS全长,之后提RNA反转录后用CDNA当模板扩增,咋扩都得不到目的片段,程序和之前扩基因组的是一样的,但是之前一直是好好的很漂亮的带,只是LATaq酶扩的时候会出现一条弱的500bp左右片段,现在反转录后可以得到这个非特异的500bp片段,就是没有1800多的,提高退火温度也不行,提高1度后就什么带都没了!折磨死我了! 求神人帮助!万分感谢! |
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2013-01-15 16:54:41, 1.69 M
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yesali
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