| 查看: 2102 | 回复: 12 | ||
[求助]
5‘Race扩不出带，求高手指点
|
本人最近做5‘Race，得到如下图。望高手解释下可能问题出在哪里呢？先在此谢过了。 |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有215人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求高手指点金和银SERS活性的差别
已经有8人回复
- 雅思怎么办，该怎么准备，求高手指点
已经有8人回复
- 求高手指点：RT-PCR的引物设计
已经有18人回复
- 求高手指点witting反应
已经有14人回复
- 静电纺丝时，针头容易堵塞，求高手指点是否也碰到过这样的问题？
已经有28人回复
- 求高手指点RNA电泳图~~~~
已经有25人回复
- 小妹急求电脑高手指点：软件安装了不能用，谢谢！
已经有1人回复
- 求高手指点：化合物能做出1HNMR 和 MS但是做不出碳谱 这是为何？
已经有9人回复
- 【求助/交流】5'Race反复做不出来，该怎么办
已经有74人回复
- 【求助/交流】RT-PCR不成功
已经有25人回复
- 【求助/交流】噬菌体DNA提取，电泳结果显示不止一条带，等待高手指点
已经有7人回复
2楼2011-04-18 09:05:09
shaquila
金虫 (正式写手)
- MolEPI: 5
- 应助: 37 (小学生)
- 金币: 1484.8
- 散金: 59
- 红花: 14
- 帖子: 553
- 在线: 182.3小时
- 虫号: 654839
- 注册: 2008-11-15
- 专业: 生物大分子结构与功能
3楼2011-04-18 09:11:54
sai00fuji
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1049.4
- 散金: 673
- 红花: 3
- 帖子: 504
- 在线: 130.4小时
- 虫号: 470099
- 注册: 2007-11-29
- 专业: 生物化学
4楼2011-04-18 11:10:28
beibei9535
荣誉版主 (职业作家)
晕晕小版主~ 姑娘你好！
- MolEPI: 7
- 应助: 15 (小学生)
- 贵宾: 1.093
- 金币: 4037.5
- 散金: 5916
- 红花: 76
- 沙发: 19
- 帖子: 3211
- 在线: 1083.4小时
- 虫号: 769521
- 注册: 2009-05-13
- 专业: 微生物学
- 管辖: 海外院所点评
5楼2011-04-18 11:31:30
shaquila
金虫 (正式写手)
- MolEPI: 5
- 应助: 37 (小学生)
- 金币: 1484.8
- 散金: 59
- 红花: 14
- 帖子: 553
- 在线: 182.3小时
- 虫号: 654839
- 注册: 2008-11-15
- 专业: 生物大分子结构与功能
6楼2011-04-18 13:49:02
shaquila
金虫 (正式写手)
- MolEPI: 5
- 应助: 37 (小学生)
- 金币: 1484.8
- 散金: 59
- 红花: 14
- 帖子: 553
- 在线: 182.3小时
- 虫号: 654839
- 注册: 2008-11-15
- 专业: 生物大分子结构与功能
【答案】应助回帖
|
根据我的经验，如果是5race，做第一次pcr时候很难获得清晰条带，而且即使有带，也大部分是rRNA，这些条带做二次pcr依旧清晰无比，测序回来才发现悲剧 除非你的pcr酶，引物，模版都很好，所以我不大建议做td或者摸索条件，这会耗费大量时间 而是用nested pcr，多设计引物，第一轮把所有gsp用55或者60做pcr（根据引物tm确定退火，别把退火弄得太高，很多manual说要把tm设计>70，除非你不做nested pcr，想一次出带，否则无所谓），如果结果不是空白，把product稀释100－200 倍，用inner gsp进行pcr，如果有清晰的带，恭喜你拉 |
7楼2011-04-18 13:57:58
8楼2011-04-18 15:37:58
9楼2011-04-18 15:40:04
10楼2011-04-18 16:19:21
50