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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 我现在P基因P不出来，基因的RNA6000多，CDS2000左右，为啥P不出？
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小木虫刘树青

木虫 (著名写手)

夜未眠

[求助] 我现在P基因P不出来，基因的RNA6000多，CDS2000左右，为啥P不出？ 已有1人参与

我现在P基因P不出来，基因的RNA6700多，CDS2000左右，为啥P不出？RNA提取有过RNAplus，QuaiGen的，反转录用过TAKARA实时反转录试剂盒，非实时反转录试剂盒，inventrgen的但是都不出，或是有模糊带，RNa电泳有最下面一条亮带，上面有两条模糊亮带，因为我们实验室条件限制，估计是降解了，而且RNA电泳也是普通琼脂糖电泳。也试过Mg离子梯度，也不行。PCR温度梯度也不出，或是有特别模糊的条带，还望高手相助！感谢！
引物设计没啥问题，premier5上100%得率

[ Last edited by 小木虫刘树青 on 2014-1-10 at 22:07 ]
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世界上只有一种真正的英雄主义，那就是看清生活的真相之后，依然热爱生活。
1楼 2014-01-10 22:03:17
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红卫大兵

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小木虫刘树青: 金币+3, ★有帮助, 没有实质性的 2014-01-11 20:43:10
我觉得还是rna没有提出来，或者你在换个引物试试，就是内参引物看看cdna好不好
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2楼2014-01-11 13:36:40
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小木虫刘树青

木虫 (著名写手)

夜未眠
引用回帖:
2楼: Originally posted by 红卫大兵 at 2014-01-11 13:36:40
我觉得还是rna没有提出来，或者你在换个引物试试，就是内参引物看看cdna好不好

我也觉得RNA不好，但是怎么才能RNA提的好呢！
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世界上只有一种真正的英雄主义，那就是看清生活的真相之后，依然热爱生活。
3楼2014-01-11 13:39:50
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小木虫刘树青

木虫 (著名写手)

夜未眠
引用回帖:
2楼: Originally posted by 红卫大兵 at 2014-01-11 13:36:40
我觉得还是rna没有提出来，或者你在换个引物试试，就是内参引物看看cdna好不好

好的，我试试内参引物，看看cDNA好不好？
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世界上只有一种真正的英雄主义，那就是看清生活的真相之后，依然热爱生活。
4楼2014-01-11 13:41:48
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小橘子2013

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 小木虫刘树青 at 2014-01-11 13:39:50
我也觉得RNA不好，但是怎么才能RNA提的好呢！...

你提的什么的rna啊？
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简简单单才是真
5楼2014-04-02 20:11:36
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