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小木虫刘树青

木虫 (著名写手)

夜未眠

[求助] 我现在P基因P不出来,基因的RNA6000多,CDS2000左右,为啥P不出? 已有1人参与

我现在P基因P不出来,基因的RNA6700多,CDS2000左右,为啥P不出?RNA提取有过RNAplus,QuaiGen的,反转录用过TAKARA实时反转录试剂盒,非实时反转录试剂盒,inventrgen的但是都不出,或是有模糊带,RNa电泳有最下面一条亮带,上面有两条模糊亮带,因为我们实验室条件限制,估计是降解了,而且RNA电泳也是普通琼脂糖电泳。也试过Mg离子梯度,也不行。PCR温度梯度也不出,或是有特别模糊的条带,还望高手相助!感谢!
引物设计没啥问题,premier5上100%得率

[ Last edited by 小木虫刘树青 on 2014-1-10 at 22:07 ]
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世界上只有一种真正的英雄主义,那就是看清生活的真相之后,依然热爱生活。
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小木虫刘树青

木虫 (著名写手)

夜未眠

引用回帖:
2楼: Originally posted by 红卫大兵 at 2014-01-11 13:36:40
我觉得还是rna没有提出来,或者你在换个引物试试,就是内参引物看看cdna好不好

好的,我试试内参引物,看看cDNA好不好?
世界上只有一种真正的英雄主义,那就是看清生活的真相之后,依然热爱生活。
4楼2014-01-11 13:41:48
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红卫大兵

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小木虫刘树青: 金币+3, 有帮助, 没有实质性的 2014-01-11 20:43:10
我觉得还是rna没有提出来,或者你在换个引物试试,就是内参引物看看cdna好不好
2楼2014-01-11 13:36:40
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小木虫刘树青

木虫 (著名写手)

夜未眠

引用回帖:
2楼: Originally posted by 红卫大兵 at 2014-01-11 13:36:40
我觉得还是rna没有提出来,或者你在换个引物试试,就是内参引物看看cdna好不好

我也觉得RNA不好,但是怎么才能RNA提的好呢!
世界上只有一种真正的英雄主义,那就是看清生活的真相之后,依然热爱生活。
3楼2014-01-11 13:39:50
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小橘子2013

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 小木虫刘树青 at 2014-01-11 13:39:50
我也觉得RNA不好,但是怎么才能RNA提的好呢!...

你提的什么的rna啊?
简简单单才是真
5楼2014-04-02 20:11:36
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