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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 未知菌DNA怎么提都提不出来。。。
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忆雨悟烟

新虫 (初入文坛)

[求助] 未知菌DNA怎么提都提不出来。。。 已有5人参与

我现在在做一株未知菌名的菌，怀疑是古菌。但是DNA怎么都提不出来，用酚氯仿手提的，有大肠杆菌作为阳性对照，大肠杆菌能出来条带，但是那个菌怎么都提不出来，该怎么提啊！！求助！
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相信我们坚持就会有美好的明天
1楼 2013-12-18 17:15:47
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开云者

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不建议手提。
方法一：如果这种菌能长成菌落 ，你就用宝生物的这个试剂盒来提一下（Lysis Buffer for Microorganism to Direct PCR），这个很便宜。
方法二：如果这个试剂盒不可以的话，你就用德国QIAGEN的试剂盒，这个大约1500，有点贵。
这些应该没有问题，你试试吧。
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挥霍不起青春
2楼2013-12-18 21:29:46
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mahayana

铜虫 (小有名气)
拼人品
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3楼2013-12-19 09:07:44
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bikexmx

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用CTAB提提试试，溶菌酶反应2个小时，蛋白酶过夜反应试试，我们实验室一直都是这么提，效果还是挺不错的
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前方总有更多挑战，战胜恐惧，勇往向前，加油~~~~
4楼2013-12-19 09:31:53
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一般提不出核酸多半是因为破碎不好。未知的菌的细胞壁成分可能比较复杂，比大肠杆菌难破的物种有的是。用破不同生物细胞壁的方法都试试，祝成功。
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5楼2013-12-19 10:12:33
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忆雨悟烟

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-12-19 10:12:33
一般提不出核酸多半是因为破碎不好。未知的菌的细胞壁成分可能比较复杂，比大肠杆菌难破的物种有的是。用破不同生物细胞壁的方法都试试，祝成功。

可是我用了石英砂，溶菌酶处理了都不行怎么办？
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相信我们坚持就会有美好的明天
6楼2013-12-19 10:53:18
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2832138056

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用PCR啊！这不是最简单可靠的方法嘛！
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7楼2013-12-19 14:26:04
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 忆雨悟烟 at 2013-12-19 10:53:18
可是我用了石英砂，溶菌酶处理了都不行怎么办？...

试试用酚加热。
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8楼2013-12-19 15:46:31
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梧桐柒夕

主管区长 (文坛精英)

优秀区长优秀区长优秀区长优秀区长优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
试用一下OMEGA的试剂盒，这种的效果要好点，多试几次，如果是古菌，那就挺难的。
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轻描淡写，浓墨重彩。
9楼2013-12-19 18:32:41
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