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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 未知菌DNA怎么提都提不出来。。。
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忆雨悟烟

新虫 (初入文坛)

[求助] 未知菌DNA怎么提都提不出来。。。 已有5人参与

我现在在做一株未知菌名的菌，怀疑是古菌。但是DNA怎么都提不出来，用酚氯仿手提的，有大肠杆菌作为阳性对照，大肠杆菌能出来条带，但是那个菌怎么都提不出来，该怎么提啊！！求助！
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相信我们坚持就会有美好的明天
1楼 2013-12-18 17:15:47
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2832138056

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用PCR啊！这不是最简单可靠的方法嘛！
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7楼2013-12-19 14:26:04
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开云者

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不建议手提。
方法一：如果这种菌能长成菌落 ，你就用宝生物的这个试剂盒来提一下（Lysis Buffer for Microorganism to Direct PCR），这个很便宜。
方法二：如果这个试剂盒不可以的话，你就用德国QIAGEN的试剂盒，这个大约1500，有点贵。
这些应该没有问题，你试试吧。
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挥霍不起青春
2楼2013-12-18 21:29:46
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bikexmx

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用CTAB提提试试，溶菌酶反应2个小时，蛋白酶过夜反应试试，我们实验室一直都是这么提，效果还是挺不错的
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前方总有更多挑战，战胜恐惧，勇往向前，加油~~~~
4楼2013-12-19 09:31:53
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一般提不出核酸多半是因为破碎不好。未知的菌的细胞壁成分可能比较复杂，比大肠杆菌难破的物种有的是。用破不同生物细胞壁的方法都试试，祝成功。
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5楼2013-12-19 10:12:33
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