应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 反转录PCR对提出来的总RNA纯度有什么要求 DNA用dna酶去除，酶不影响后续实验吗？
61/1返回列表
查看: 4128  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

luyongchao

新虫 (小有名气)

[求助] 反转录PCR对提出来的总RNA纯度有什么要求 DNA用dna酶去除，酶不影响后续实验吗？

如题
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-01-02 20:58:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hlwnxfd2011

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用DNAase处理过后，要用氯仿抽提的吧。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2013-01-02 21:36:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
对做反转录的RNA的质量当然是纯度高的好。有DNA污染肯定不行，用DNase对后面实验当然有影响，酶处理后可以如2L说的酚氯仿抽提，也可以加热失活。
赞一下 回复此楼
3楼2013-01-03 06:58:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

郜珊

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
luyongchao: 金币+3, ★★★★★最佳答案, 你的字最多，呵呵 2013-01-09 11:07:53
因为RNA很容易降解，提取的时候要小心，戴口罩，手套，不要和同学说话（防止RNA降解），还要注意它的保存条件，防止降解。RNA纯度要高。加DNA酶是降解DNA，以防对RNA污染。酶可以在后续实验中加氯仿使其失活。
赞一下 回复此楼
4楼2013-01-03 12:05:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangjianchen

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
DNA酶处理后要把DNA酶再去掉，很麻烦，而且有可能会RNA降解，条件控制起来要求比较高，所以提的时候就尽量要把DNA去掉，一步到位最好
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2013-01-03 19:00:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

froess

新虫 (初入文坛)
RT后的总RNA要测一下OD值，在1.8~2.2之间为质量最好。要想获得较纯的RNA，最好在超净工作台提取，戴手套口罩，不知你用的是手工提取还是试剂盒提取，如果是手工，所有过程均应冰上进行。DNA在提取的过程中就应除去了，一般污染都是有机溶剂污染。如果要求质量还是选择试剂盒提取吧
赞一下 回复此楼
6楼2013-05-01 21:04:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 luyongchao 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 268求调剂 +3 简单点0 2026-03-02 4/200 2026-03-02 11:14 by 黑！在干嘛
[考研] 284求调剂 +10 天下熯 2026-02-28 11/550 2026-03-02 11:03 by 无际的草原
[考研] 材料学硕318求调剂 +7 February_Feb 2026-03-01 7/350 2026-03-02 10:57 by 无际的草原
[考研] 材料复试调剂 +4 学材料的点 2026-03-01 5/250 2026-03-02 08:26 by houyaoxu
[考研] 279求调剂 +3 dua1 2026-03-01 4/200 2026-03-02 00:23 by 大脸蛋子
[考研] 材料化工调剂 +12 今夏不夏 2026-03-01 13/650 2026-03-01 23:32 by L135790
[基金申请] 成果系统访问量大，请一小时后再尝试。---NSFC啥时候好哦，已经两天这样了 +4 NSFC2026我来了 2026-02-28 4/200 2026-03-01 22:37 by 铁门栓
[硕博家园] 博士自荐 +7 科研狗111 2026-02-26 11/550 2026-03-01 22:24 by 哲平L
[考研] 0805总分292，求调剂 +7 幻想之殇 2026-03-01 7/350 2026-03-01 21:22 by 公瑾逍遥
[考研] 299求调剂 +3 Y墨明棋妙Y 2026-02-28 5/250 2026-03-01 21:01 by tangxiaotian
[考研] 306分材料调剂 +4 chuanzhu川烛 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:48 by 无际的草原
[考研] 一志愿中南大学理学化学 +4 15779376950 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:00 by Fff-1
[考研] 328求调剂 +3 aaadim 2026-03-01 5/250 2026-03-01 17:29 by njzyff
[考研] 化工专硕348，一志愿985求调剂 +5 弗格个 2026-02-28 8/400 2026-03-01 17:25 by sunny81
[考研] 311求调剂 +6 亭亭亭01 2026-03-01 6/300 2026-03-01 15:41 by 324616
[考研] 303求调剂 +4 今夏不夏 2026-03-01 4/200 2026-03-01 14:46 by 嘟嘟小浣熊
[考研] 295复试调剂 +3 简木ChuFront 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:27 by zzxw520th
[考研] 调剂 +3 简木ChuFront 2026-02-28 3/150 2026-03-01 11:46 by 王伟要上岸啊
[论文投稿] 求助coordination chemistry reviews 的写作模板 10+3 ljplijiapeng 2026-02-27 4/200 2026-03-01 09:07 by babero
[考研] 085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂 +8 吃宵夜1 2026-02-28 10/500 2026-02-28 20:27 by L135790
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭