| 查看: 2283 | 回复: 11 | ||
憨憨可爱多木虫 (正式写手)
|
[求助]
为什么我总是 提不纯DNA啊，
|
| 为什么我用试剂盒总是提不纯植物DNA啊，提很多次了，每次都是提不纯，烦死了 |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有72人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 为啥总是提不出自然界微生物群落的总DNA
已经有6人回复
- 哪位大神来告诉我，为什么最近提不出总DNA
已经有15人回复
- 关于提DNA后，测的OD值问题，有杂志
已经有7人回复
- 为何CTAB法提取的DNA总是断裂？
已经有40人回复
- 总是无法提出植物DNA，快哭了。。。
已经有17人回复
- 每次DNA提取后检测结果都如图，连着好几天了，为什么？？？？
已经有14人回复
- 提的纯菌DNA的琼脂糖凝胶电泳怎么跑成这个样子?
已经有25人回复
- 求助——真菌DNA提取
已经有11人回复
- 求助：酚氯仿抽提的DNA，吸光曲线峰值总是在270nm附近
已经有11人回复
- 为什么提取的DNA总是降解？
已经有41人回复
- 提RNA的时候怎么才能避免ＤＮＡ污染呢？
已经有18人回复
- 提取RNA时，为何会有DNA条带，并且有且只有一条带？
已经有9人回复
- 丝状真菌提取总DNA问题
已经有14人回复
- 基因组提取
已经有7人回复
- 为什么DNA提取总降解
已经有15人回复
- 【求助/交流】DNA提取
已经有3人回复
- 【求助/交流】提取的DNA纯度不好
已经有10人回复
- 【求助/交流】为什么内切酶总是切不开我的DNA
已经有14人回复
bullfrog325
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 193 (高中生)
- 金币: 2880.3
- 散金: 200
- 红花: 24
- 帖子: 744
- 在线: 269.5小时
- 虫号: 1864929
- 注册: 2012-06-20
2楼2013-06-04 02:07:03
憨憨可爱多
木虫 (正式写手)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 2554.3
- 散金: 16
- 红花: 1
- 帖子: 342
- 在线: 93小时
- 虫号: 1906119
- 注册: 2012-07-23
- 性别: GG
- 专业: 林木遗传育种学
3楼2013-06-04 07:34:32
4楼2013-06-04 08:25:59
憨憨可爱多
木虫 (正式写手)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 2554.3
- 散金: 16
- 红花: 1
- 帖子: 342
- 在线: 93小时
- 虫号: 1906119
- 注册: 2012-07-23
- 性别: GG
- 专业: 林木遗传育种学
|
1. 取植物新鲜组织0.1g，加入液氮充分研磨成粉末状。样品量不超过0.1g，过多的样品使得裂解不充分，最终会导致基因组DNA提取量减少。 2. 实验前，在1.5ml离心管中加入800ul的Lysis Buffer，于65℃下预热，然后加入β-巯基乙醇至终浓度为0.1%（0.8ul-1ul）。 3. 将研磨好的粉末加到以上预备好的Lysis Buffer中，65℃水浴20-30min，其间颠倒混匀样品数次。 4. 加入500ul氯仿，充分混匀，12000rpm离心5min。（若植物组织富含酚类、糖类（淀粉），应在此步骤前进行50ul酚：氯仿=1：1抽提一次） 5. 小心吸取上层水相转入一个新的离心管中，加入700ul Binging buffer，充分混匀。 6. 将混匀的液体转入离心柱中（可分次转入），12000rpm离心1min。 7. 加入700ul Wash Buffer A，12000rpm离心1min，弃废液。 8. 加入700ul Wash Buffer B，12000rpm离心1min，弃废液。 9. 加入500ul Wash Buffer B，12000rpm离心1min，弃废液。 10. 再次12000rpm离心2min，将离心柱置于新的离心管中，并打开离心柱盖，于室温或37℃放置5-10min，至无明显乙醇味。 11. 加入50-200ul（100ul）TE buffer（事先预热55-65℃），置于室温2-5min，12000rpm离心2min，离心管中即为所提取的基因组DNA溶液。 |
5楼2013-06-04 11:19:52
蓝慧
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 15 (小学生)
- 金币: 2721.8
- 散金: 13
- 红花: 1
- 帖子: 387
- 在线: 173.2小时
- 虫号: 1275376
- 注册: 2011-04-23
- 性别: MM
- 专业: 植物病理学
6楼2013-06-04 13:43:51
bullfrog325
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 193 (高中生)
- 金币: 2880.3
- 散金: 200
- 红花: 24
- 帖子: 744
- 在线: 269.5小时
- 虫号: 1864929
- 注册: 2012-06-20
7楼2013-06-04 15:33:54
8楼2013-06-04 15:56:36
yiloutingyu
铜虫 (小有名气)
- 应助: 6 (幼儿园)
- 金币: 37.9
- 红花: 1
- 帖子: 67
- 在线: 32.4小时
- 虫号: 1934305
- 注册: 2012-08-11
- 专业: 植物病理学
9楼2013-06-04 23:11:22
chenguestc
木虫 (职业作家)
- MolEPI: 7
- 应助: 576 (博士)
- 贵宾: 0.4
- 金币: 4526.9
- 散金: 1639
- 红花: 176
- 帖子: 4708
- 在线: 353.5小时
- 虫号: 1337860
- 注册: 2011-07-05
- 性别: GG
- 专业: 作物分子育种
10楼2013-06-05 07:50:49
