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[交流]
哪位大神来告诉我，为什么最近提不出总DNA 已有10人参与
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| 我提的是窖池中微生物的总DNA，主要样品来源为大曲，窖泥，前段时间用上海生工的Ezup柱式基因组DNA抽提试剂盒（细菌），也用过生工的土壤基因组抽提试剂盒，可是就是没提出来，不知道什么原因，好着急，觉都睡不着了，都快一个月了，求各位大神指点。 |
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zhang881007
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3楼2013-01-11 08:56:51
ccharlien
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2楼2013-01-11 03:01:55
蜗牛-killer
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4楼2013-01-11 10:21:30
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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| 最近也在做，就是土壤的微生物，我是通过把土壤上的微生物洗脱后，然后取上层清夜然后抽滤，得到菌体，再提DNA。一天中提了三次DNA，也是用试剂盒的，前两次都没提出来，后面加大菌量，同时菌的纯度通过多次离心洗涤也得到提高，最后柱式洗脱时，TE预热，室内放置几分钟后，100微的TE分两次洗涤的（即每次50微），最后提出来了，但是浓度有些偏低。所以个人拙见：认为提细菌总DNA的关键是菌量和菌的纯度（就是不要有其他杂质污染，这个在后续的过程中可能会堵塞柱子，导致后面DNA得率低，严重的时候根本得不到）。come on !cheer up! |
5楼2013-01-11 11:44:18
6楼2013-01-11 13:37:38
7楼2013-01-11 13:44:26
8楼2013-01-12 10:13:46
9楼2013-01-12 13:15:11
10楼2013-01-15 15:01:31