24小时热门版块排行榜    

查看: 1952  |  回复: 15

vivi忆默

新虫 (初入文坛)

[交流] 哪位大神来告诉我,为什么最近提不出总DNA 已有10人参与

我提的是窖池中微生物的总DNA,主要样品来源为大曲,窖泥,前段时间用上海生工的Ezup柱式基因组DNA抽提试剂盒(细菌),也用过生工的土壤基因组抽提试剂盒,可是就是没提出来,不知道什么原因,好着急,觉都睡不着了,都快一个月了,求各位大神指点。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

zhang881007

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
别急慢慢来。我的建议是你取大曲后,仅可能地用PBS洗涤,确保残留物为细胞后,再抽提。
shine
3楼2013-01-11 08:56:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

ccharlien

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
以前可以现在不行肯定是有什么改变了啊 仔细排查
2楼2013-01-11 03:01:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蜗牛-killer

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我也是 最近总失败
哇咔咔~
4楼2013-01-11 10:21:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fdzkfdzk1

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
最近也在做,就是土壤的微生物,我是通过把土壤上的微生物洗脱后,然后取上层清夜然后抽滤,得到菌体,再提DNA。一天中提了三次DNA,也是用试剂盒的,前两次都没提出来,后面加大菌量,同时菌的纯度通过多次离心洗涤也得到提高,最后柱式洗脱时,TE预热,室内放置几分钟后,100微的TE分两次洗涤的(即每次50微),最后提出来了,但是浓度有些偏低。所以个人拙见:认为提细菌总DNA的关键是菌量和菌的纯度(就是不要有其他杂质污染,这个在后续的过程中可能会堵塞柱子,导致后面DNA得率低,严重的时候根本得不到)。come on !cheer up!
5楼2013-01-11 11:44:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jk_xdx

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
用水浸土壤,再取上清,用SDS法提。
6楼2013-01-11 13:37:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

vivi忆默

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ccharlien at 2013-01-11 03:01:55
以前可以现在不行肯定是有什么改变了啊 仔细排查

谢谢你的关注。基本上样品和试剂,还有方法都是和以前一样的,样品预处理了以后用试剂盒抽提,就是不知道天气太冷了会不会对效果有影响
7楼2013-01-11 13:44:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小_木虫

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
不用试剂盒提取不行吗?
8楼2013-01-12 10:13:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

四裤全输123

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
用MoBIo的powersoil或者MP的fast spin 试剂盒,效果不错
9楼2013-01-12 13:15:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

vivi忆默

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 蜗牛-killer at 2013-01-11 10:21:30
我也是 最近总失败

加油,好好摸索下方法,我也还是纠结中
10楼2013-01-15 15:01:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 vivi忆默 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+3 winsaint 2026-08-27 6/300 2026-08-28 01:46 by alongwaytogo
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +15 爱看书的可乐 2026-08-26 17/850 2026-08-28 01:23 by xxniao123
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +9 Kittylucky 2026-08-27 9/450 2026-08-28 01:08 by jurkat.1640
[教师之家] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 XLGfUIdOmEAO 2026-08-27 4/200 2026-08-27 22:26 by 3RAFyYXYSwGS
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[教师之家] 导师吐槽:我怎么摊上了这么个极品研究生! +7 苏东坡二世 2026-08-23 7/350 2026-08-27 18:14 by 瞬息宇宙
[基金申请] 申请删除本帖 +6 lyz123lyz 2026-08-27 7/350 2026-08-27 17:31 by 宁静致远sy
[基金申请] 基金不中,共勉 +10 eulota 2026-08-26 10/500 2026-08-27 17:23 by lqllinqiaoli
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[文学芳草园] 梦想 +3 myrtle 2026-08-26 3/150 2026-08-27 10:01 by angelyueyi
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 LIbGuocjEEYw 2026-08-26 4/200 2026-08-27 04:33 by Ie9AyIAvGbvs
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +22 羊腰板 2026-08-21 25/1250 2026-08-26 15:00 by zuocuiping
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 国合现在查不到了吗? +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
信息提示
请填处理意见