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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】DNA提取
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pidou213

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】DNA提取

本人提取昆虫的DNA，每次都不成功。不知道为何？

下面的部分（从左至右依次为lane1 DNA； lane2 DNA；Lane 3 Marker（Trans 2K plus））不知道中间的那条隐约的条带是不是DNA？可否用来做后续PCR？


这种情况的原因是什么？

请虫虫们指正。
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1楼 2011-01-05 21:56:05
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xiaoqi708

木虫 (正式写手)
★ ★
pidou213(金币+3):谢谢回复，能否再帮助回答一下下面的问题？ 2011-01-05 22:48:01
rainwander(金币+2):鼓励积极参与~~~ 2011-01-05 23:40:28
1：蛋白质没有去除干净，所以胶孔中看起来是明亮的。
2：RNA没有完全降解，建议在含有RNA酶处理的溶液中多放置一段时间，或者加大RNA酶的浓度。
3：中间的是DNA，因为DNA在提取过程中由于机械力的作用，一般都会被片段化，所以看起来有拖尾的现象，另外由于不干净所致。

这种DNA不建议做后续的实验，应该将DNA纯化一下，用酚氯仿抽提一下即可。
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2楼2011-01-05 22:12:58
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pidou213

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by xiaoqi708 at 2011-01-05 22:12:58:
1：蛋白质没有去除干净，所以胶孔中看起来是明亮的。
2：RNA没有完全降解，建议在含有RNA酶处理的溶液中多放置一段时间，或者加大RNA酶的浓度。
3：中间的是DNA，因为DNA在提取过程中由于机械力的作用，一般都会 ...

从RNA的角度来看的话，是不是细胞破碎部分是没有问题了吧？？

那为什么DNA反而提取不出来呢？还请指点
赞一下 回复此楼
3楼2011-01-05 22:48:56
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zmw_520

禁虫 (小有名气)
★
最爱花诗雨(金币+1):鼓励参与交流 2011-01-06 19:07:35
pidou213(金币+1):谢谢啊 2011-01-07 11:11:13
本帖内容被屏蔽
4楼2011-01-06 18:58:53
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