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pidou213

木虫 (正式写手)

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[交流] 【求助/交流】DNA提取

本人提取昆虫的DNA，每次都不成功。不知道为何？

下面的部分（从左至右依次为lane1 DNA； lane2 DNA；Lane 3 Marker（Trans 2K plus））不知道中间的那条隐约的条带是不是DNA？可否用来做后续PCR？

这种情况的原因是什么？

请虫虫们指正。

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1楼 2011-01-05 21:56:05

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xiaoqi708

木虫 (正式写手)

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★ ★
pidou213(金币+3):谢谢回复，能否再帮助回答一下下面的问题？ 2011-01-05 22:48:01
rainwander(金币+2):鼓励积极参与~~~ 2011-01-05 23:40:28

1：蛋白质没有去除干净，所以胶孔中看起来是明亮的。
2：RNA没有完全降解，建议在含有RNA酶处理的溶液中多放置一段时间，或者加大RNA酶的浓度。
3：中间的是DNA，因为DNA在提取过程中由于机械力的作用，一般都会被片段化，所以看起来有拖尾的现象，另外由于不干净所致。

这种DNA不建议做后续的实验，应该将DNA纯化一下，用酚氯仿抽提一下即可。

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2楼2011-01-05 22:12:58

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pidou213

木虫 (正式写手)

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引用回帖:

Originally posted by xiaoqi708 at 2011-01-05 22:12:58:
1：蛋白质没有去除干净，所以胶孔中看起来是明亮的。
2：RNA没有完全降解，建议在含有RNA酶处理的溶液中多放置一段时间，或者加大RNA酶的浓度。
3：中间的是DNA，因为DNA在提取过程中由于机械力的作用，一般都会 ...

从RNA的角度来看的话，是不是细胞破碎部分是没有问题了吧？？

那为什么DNA反而提取不出来呢？还请指点

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3楼2011-01-05 22:48:56

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