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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】有关DNA提取
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leon198418029

金虫 (小有名气)

research associate

[交流] 【求助/交流】有关DNA提取 已有11人参与

我用的是氯仿异戊醇提取方法，听说用它提取DNA后，DNA和RNA溶解在不同相里。那么RNA是不是溶解在有机相里？这是为什么？它不像DNA一样为极性分子吗？
另外，除此之外，其他DNA提取方法是不是必须用RNA酶消化，否则会遭到RNA污染？
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不忘初心，为梦远行。
1楼 2010-05-05 13:13:26
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liyong1981

金虫 (正式写手)
★ ★
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scelab(金币+1):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-05-05 15:39:01
RNA主要还是靠RNASE去除的，所以，肯定是要加的～
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2楼2010-05-05 13:21:55
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gaiyf

金虫 (正式写手)
★
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我们也用同样的方法体DNA但是要加RNASE，不然会有RNA污染
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多看文献，多学知识
3楼2010-05-05 15:19:19
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快乐由自己go

银虫 (小有名气)
★
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引用回帖:
Originally posted by leon198418029 at 2010-05-05 13:13:26:
我用的是氯仿异戊醇提取方法，听说用它提取DNA后，DNA和RNA溶解在不同相里。那么RNA是不是溶解在有机相里？这是为什么？它不像DNA一样为极性分子吗？
另外，除此之外，其他DNA提取方法是不是必须用RNA酶消化，否 ...

想请教楼主“DNA和RNA溶解在不同相里”是在哪里说的？DNA 和RNA在结构上的差别不至于使它们分得这么明显吧？我认为还是得靠RNase去除RNA。
多多交流……
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4楼2010-05-05 15:58:19
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
传统方法提取DNA，应该不是分离在不同相中，其实这种方法就是不保护RNA，肯定会提出降解的RNA的，必须要使用RNA酶处理，但是很多DNA实验，RNA不影响下一步操作，所以要不要处理，看你要做什么了
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5楼2010-05-05 18:24:03
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虫子火箭兵

金虫 (正式写手)
★
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DNA与RNA在PH值在4.8-5.2时会分离的,不过这种方法在提取RNA时为了去除DNA才使用，DNA溶解在水相和有机相之间，而RNA溶解在水相中
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6楼2010-05-05 19:12:06
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changyihai

铁虫 (正式写手)
★
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你可以用NaCl的方法提取，0.14mol/L是一个临界浓度。控制好这个浓度可以把DNA和RNA分开？
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7楼2010-05-05 19:26:51
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yixuanwin

铁杆木虫 (正式写手)
★
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dna提取千差万别，看你提什么了。 另外RNA这个，也是要看你提dna的目的是什么。 光做个特异引物pcr什么。不加RNA酶也没事。  

   一般现在都直接用试剂盒提取了。ctab的越来越少。 试剂盒自带的RNA酶。
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8楼2010-05-05 20:44:09
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shengwufenzi

金虫 (正式写手)
★
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要想除尽RNA必须要加RNAse的
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9楼2010-05-05 21:22:51
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todouhy

铜虫 (小有名气)
★
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一般我们的RNA不处理也不会影响后续操作的，毕竟那个片段是很短的，我们做克隆的时候没有去除！
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10楼2010-05-05 21:30:58
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