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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » DNA提取问题求解
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欧朵拉

铁虫 (小有名气)

[求助] DNA提取问题求解 已有4人参与

提取DNA过程中必须要加入RNase去除RNA吗？所加RNase的量是多少？（提取DNA用于后续的PCR实验）
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做自己喜欢的事情，心态决定一切~
1楼 2011-12-02 13:00:41
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wucs27

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流。 2011-12-02 19:50:09
amisking: 回帖置顶 2011-12-02 19:50:11
这要看你的目的是什么，一般不用去RNA.如下游是进行PCR,酶切等，无需去rna。如果要去rna,可以在抽提的过程中加入rnase a。
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3楼2011-12-02 14:45:24
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

amisking: 回帖置顶 2011-12-02 19:50:15
不需要，RNA很容易降解，可以室温放一会。
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jiayoubashaonian
6楼2011-12-02 17:06:15
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普通回帖

703600973

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

要，可以10ul每毫升
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2楼2011-12-02 14:43:27
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shrimp5555

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

同意楼上的，这个是看你的需求的，没有影响就不需要去做多一步咯
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大大傻气加上少少耍流氓
4楼2011-12-02 14:55:36
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wangcheng2650

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

个人觉得不需要，看具体实验要求！
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日子是混出来的！
5楼2011-12-02 16:56:12
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robert1988

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
wanhscn(金币+3): 鼓励交流 2011-12-03 08:50:40
看用途，如果不是RT，一般不需要吧
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7楼2011-12-02 18:55:48
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
wanhscn(金币+1): 鼓励交流 2011-12-03 08:50:24
我们一般加一点RNase，室温放置一个小时左右
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8楼2011-12-02 20:22:15
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peng~yu

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
wanhscn(金币+5): 鼓励新虫友回应助帖！ 2011-12-03 08:50:11
我一般提取DNA的话最后一定要用RNAase消化一段时间~不然跑出的电泳图很难看，我一直的加量是3ul，我加水溶解DNA的量是50ul，然后在37度水浴半小时左右，这样基本上就能消化完全~而且后续的PCR也完全没有问题~
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9楼2011-12-02 23:24:27
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haozilai99

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我们上次提取质粒DNA，没有吧。只加了sds碱破坏OK。
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想到就去做。。。
10楼2011-12-03 10:22:24
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