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欧朵拉

铁虫 (小有名气)

[求助] DNA提取问题求解 已有4人参与

提取DNA过程中必须要加入RNase去除RNA吗?所加RNase的量是多少?(提取DNA用于后续的PCR实验)
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wucs27

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流。 2011-12-02 19:50:09
amisking: 回帖置顶 2011-12-02 19:50:11
这要看你的目的是什么,一般不用去RNA.如下游是进行PCR,酶切等,无需去rna。如果要去rna,可以在抽提的过程中加入rnase a。
3楼2011-12-02 14:45:24
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

amisking: 回帖置顶 2011-12-02 19:50:15
不需要,RNA很容易降解,可以室温放一会。
jiayoubashaonian
6楼2011-12-02 17:06:15
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普通回帖

703600973

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

要,可以10ul每毫升
2楼2011-12-02 14:43:27
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shrimp5555

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

同意楼上的,这个是看你的需求的,没有影响就不需要去做多一步咯
大大傻气加上少少耍流氓
4楼2011-12-02 14:55:36
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wangcheng2650

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

个人觉得不需要,看具体实验要求!
日子是混出来的!
5楼2011-12-02 16:56:12
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robert1988

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
wanhscn(金币+3): 鼓励交流 2011-12-03 08:50:40
看用途,如果不是RT,一般不需要吧
7楼2011-12-02 18:55:48
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joan198108

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


wanhscn(金币+1): 鼓励交流 2011-12-03 08:50:24
我们一般加一点RNase,室温放置一个小时左右
8楼2011-12-02 20:22:15
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peng~yu

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
wanhscn(金币+5): 鼓励新虫友回应助帖! 2011-12-03 08:50:11
我一般提取DNA的话最后一定要用RNAase消化一段时间~不然跑出的电泳图很难看,我一直的加量是3ul,我加水溶解DNA的量是50ul,然后在37度水浴半小时左右,这样基本上就能消化完全~而且后续的PCR也完全没有问题~
9楼2011-12-02 23:24:27
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haozilai99

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我们上次提取质粒DNA,没有吧。只加了sds碱破坏OK。
想到就去做。。。
10楼2011-12-03 10:22:24
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