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panzhiyuan01

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

不需要,RNA在室温下讲解
oneday,iwillbecomethemanwhoyoulovetruely
11楼2011-12-03 12:26:31
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gjs713

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

一般用途完全没必要除RNA,根本不影响的。。
勤奋、执着、专注,则无坚不破。
12楼2011-12-03 16:06:48
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欧朵拉

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wucs27 at 2011-12-02 14:45:24:
这要看你的目的是什么,一般不用去RNA.如下游是进行PCR,酶切等,无需去rna。如果要去rna,可以在抽提的过程中加入rnase a。

我提的DNA主要用于后续的定量PCR实验。每次抽提没法确定RNase的量,抽提后什么也没有了。
做自己喜欢的事情,心态决定一切~
13楼2011-12-06 15:02:15
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欧朵拉

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
12楼: Originally posted by gjs713 at 2011-12-03 16:06:48:
一般用途完全没必要除RNA,根本不影响的。。

用于荧光定量PCR,有RNA存在影响大吗?
做自己喜欢的事情,心态决定一切~
14楼2011-12-06 15:03:15
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欧朵拉

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by wucs27 at 2011-12-02 14:45:24:
这要看你的目的是什么,一般不用去RNA.如下游是进行PCR,酶切等,无需去rna。如果要去rna,可以在抽提的过程中加入rnase a。

抽提后什么也没有了····
做自己喜欢的事情,心态决定一切~
15楼2011-12-06 15:04:21
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暧醉殇

捐助贵宾 (小有名气)


【答案】应助回帖

RNA可以不去除,但是去除后PCR的效果更好。由于RNA的存在,可能会导致非特异性扩增,影响PCR的结果的观察。
16楼2011-12-06 23:05:30
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crush_bc

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

看你具体的扩增目的和实验要求了~~RNA很容易降解,要求不严格多防止一会儿即可~~要求高的话可以加5um除去啦~~
17楼2011-12-06 23:19:52
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lder

木虫 (正式写手)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
看你后续试验中,RNA对你的实验是否有干扰,如果没有干扰,则不需要加Rnase,如果有干扰,则每ml加10ul的RNase处理30min左右,处理时间过长容易的导致DNA的降解。
18楼2012-01-12 10:56:45
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寳亿

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

一般不需要,RNA很容易降解的,室温下放一会儿就没有了。
19楼2015-01-29 17:40:13
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你快乐吗

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我们实验室是用试剂盒提取的,要求在悬浮液里面加入RNase的,将产物做PCR或者转化基本都没问题,个人觉得还是加的为好
20楼2015-01-29 22:12:57
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