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ybfang

木虫 (小有名气)

[求助] 植物DNA的提取的一些问题。求解已有2人参与

最近老板突然要我做植物DNA提取。小菜一名。有几个问题想问问大家。
1植物是采来的的青梅枝叶和果实,快递了两天才到,0度冰箱保存。叶子不是很嫩,比较老,可以提取DNA吗
2实验室没有液氮,可以用直接用枪头或者自制的研磨棒捣碎吗,另外可以加裂解液超声数分钟破壁吗(DNA片段超声可能断裂?!)外文有用反复冻融法,不过时间太长了。
3提取植物DNA,研磨、抽提一定要在超净台操作吗?细菌不会污染吗
4炮制过的药材提取DNA可能性。例如乌梅,低温烘烤的和炒炭的(文献居然有提取到乌梅炭的DNA?)。
求解答。另外求一比较简单的提取方法。
谢谢。
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qianhaocool

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+5, 鼓励交流 2014-05-15 12:43:19
ybfang: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-05-16 23:00:22
1、腐败会造成DNA提出不出来,至于是干的,还是加工过的,甚至烘干过的都有可能提出DNA。所以建议你放在-20冰箱。
2、没有液氮就买啊。植物DNA的细胞壁那么坚韧,冻融和超声一般只有细菌和动物组织采用。
3、1g的组织提取不需要什么超净,如果微量提,还是注意点吧。
4、我建议你用CTAB法提取。我给你个文献《江蓠属和龙须菜属5种海藻ITS序列分子系统学分析》
2楼2014-05-15 11:36:06
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ybfang

木虫 (小有名气)

3楼2014-05-16 01:02:36
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ybfang

木虫 (小有名气)

4楼2014-05-16 22:59:59
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
ybfang: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-05-17 23:19:24
K.Edwards, C.Johnstone and C.Thompson
A simple and rapid method for the preparation of plant genomic DNA for PCR analysis
Nucleic Acids Research, Vol. 19, No. 6: 1349
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
5楼2014-05-17 18:17:12
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