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sswisdomss

木虫 (著名写手)

[求助] 关于植物叶片DNA提取

用天根的植物DNA提取试剂盒提取叶片DNA,说明书上是说100mg能提3~30μg DNA,可是我做了几次都是0.1~0.2g叶片提出约4μg DNA,纯度倒是比较高,就是觉得量太少了,不知同行们做的结果怎么样,多少叶片能提出多少DNA?我做的算是正常情况吗?请赐教
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苏小冶

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
sswisdomss: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢 2012-10-26 21:14:14
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-10-27 15:46:42
sswisdomss: 金币+2, 有帮助 2012-12-10 14:08:33
呵呵,这位妹纸,试剂盒提植物叶片DNA我没有做过~我都是用CTAB法提的,效果都还行,纯化后OD260/OD280也都在1.8左右。
基本上我觉得你的提取量算不低啦,我用1g植物叶片能提取最多20μg DNA,一般在1.5μg左右。
玄之又玄,众妙之门。
2楼2012-10-26 19:05:53
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sswisdomss

木虫 (著名写手)

再顶一下,麻烦大家回答
3楼2012-10-28 11:48:04
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sswisdomss

木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 苏小冶 at 2012-10-26 19:05:53
呵呵,这位妹纸,试剂盒提植物叶片DNA我没有做过~我都是用CTAB法提的,效果都还行,纯化后OD260/OD280也都在1.8左右。
基本上我觉得你的提取量算不低啦,我用1g植物叶片能提取最多20μg DNA,一般在1.5μg左右。

再请教一下,植物叶片现在4℃放置了2周(还是绿的),然后放置在-80℃的冰箱,提DNA的时候再从-80℃取出来(叶子是绿的),这样提取的DNA质量如何呢?叶片在-80℃时DNA会不会降解?
4楼2012-12-10 14:08:13
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l林家丽

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
sswisdomss: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-12-11 15:09:08
叶片在-80℃时DNA不会降解,如果你的叶片是在硅胶中干燥的 ,那么DNA的降解速率就更慢了,一般可保存1-2年
不争小可不失大道
5楼2012-12-10 19:30:31
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小齐018

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
sswisdomss: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-12-11 15:09:17
sswisdomss: 金币+1, 有帮助 2013-02-01 10:30:43
试剂盒我没用过,我用的SDS抽提法,我一般加200mg的叶片,加800ml的SDS提取液。你4微克也在3-30微克的范围内。
6楼2012-12-10 23:30:07
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kxs2001

金虫 (著名写手)

xuexile!
我知道,主爱我!
7楼2014-11-04 16:40:09
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王靖1992

新虫 (初入文坛)

天根试剂盒提取DNA时的含量就比较少,但是他提取出来DNA的纯度比CTAB提取出来的纯度要好。你可以对比两者提取出来的DNA进行电泳检测,就会发现条带亮度的差异
拥有自己被别人拿不走的东西。
8楼2015-02-01 19:22:32
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