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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于植物叶片DNA提取
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sswisdomss

木虫 (著名写手)

[求助] 关于植物叶片DNA提取

用天根的植物DNA提取试剂盒提取叶片DNA，说明书上是说100mg能提3~30μg DNA，可是我做了几次都是0.1~0.2g叶片提出约4μg DNA，纯度倒是比较高，就是觉得量太少了，不知同行们做的结果怎么样，多少叶片能提出多少DNA？我做的算是正常情况吗？请赐教
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1楼 2012-10-26 15:06:00
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苏小冶

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
sswisdomss: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢 2012-10-26 21:14:14
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-10-27 15:46:42
sswisdomss: 金币+2, ★有帮助 2012-12-10 14:08:33
呵呵，这位妹纸，试剂盒提植物叶片DNA我没有做过~我都是用CTAB法提的，效果都还行，纯化后OD260/OD280也都在1.8左右。
基本上我觉得你的提取量算不低啦，我用1g植物叶片能提取最多20μg DNA，一般在1.5μg左右。
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玄之又玄，众妙之门。
2楼2012-10-26 19:05:53
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sswisdomss

木虫 (著名写手)
再顶一下，麻烦大家回答
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3楼2012-10-28 11:48:04
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sswisdomss

木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 苏小冶 at 2012-10-26 19:05:53
呵呵，这位妹纸，试剂盒提植物叶片DNA我没有做过~我都是用CTAB法提的，效果都还行，纯化后OD260/OD280也都在1.8左右。
基本上我觉得你的提取量算不低啦，我用1g植物叶片能提取最多20μg DNA，一般在1.5μg左右。

再请教一下，植物叶片现在4℃放置了2周（还是绿的），然后放置在-80℃的冰箱，提DNA的时候再从-80℃取出来（叶子是绿的），这样提取的DNA质量如何呢？叶片在-80℃时DNA会不会降解？
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4楼2012-12-10 14:08:13
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l林家丽

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
sswisdomss: 金币+3, ★★★很有帮助 2012-12-11 15:09:08
叶片在-80℃时DNA不会降解，如果你的叶片是在硅胶中干燥的 ，那么DNA的降解速率就更慢了，一般可保存1-2年
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不争小可不失大道
5楼2012-12-10 19:30:31
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小齐018

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
sswisdomss: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-12-11 15:09:17
sswisdomss: 金币+1, ★有帮助 2013-02-01 10:30:43
试剂盒我没用过，我用的SDS抽提法，我一般加200mg的叶片，加800ml的SDS提取液。你4微克也在3-30微克的范围内。
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6楼2012-12-10 23:30:07
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kxs2001

金虫 (著名写手)
xuexile!
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我知道，主爱我！
7楼2014-11-04 16:40:09
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王靖1992

新虫 (初入文坛)
天根试剂盒提取DNA时的含量就比较少，但是他提取出来DNA的纯度比CTAB提取出来的纯度要好。你可以对比两者提取出来的DNA进行电泳检测，就会发现条带亮度的差异
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拥有自己被别人拿不走的东西。
8楼2015-02-01 19:22:32
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