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崔永霞铁虫 (小有名气)
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DNA的提取和纯化
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| 各位高手我最近在提DNA，刚刚接触，大家有没有人知道DNA提取过程中的PVP和tris-饱和酚的作用是什么啊，可不可以给我说一说啊？ |
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 DNA纳米技术 |
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Tris饱和酚一般PH大于7.8，用于DNA的提取。其中，酚是强的蛋白变性剂，可以使细胞或组织中的蛋白质变性析出。而Tris的主要作用是防治止酚类氧化，若酚类氧化，则会形成醌（两个苯环），醌含有强自由基，会破坏核酸结构,Tris-HCl (pH8.0)提供一个缓冲环境,防止核酸被破坏。 同时，由于PH值大于7，在碱性环境中DNA处于水相，RNA处于有机相。从而分离上清，即可得到DNA。 PVPPVP(聚乙烯吡咯烷酮)是酚的络合物,能与多酚形成一种不溶的络合物质,有效去除多酚,减少DNA中酚的污染;同时它也能和多糖结合,有效去除多糖. |
3楼2013-07-12 11:30:36
hyc_charles
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PVP的用途主要是在配置CTAB时用的，你使用改良的CTAB法提取DNA的嘛？ CTAB 提取液（PH 8.0）的配方如下：称取CTAB 2 g，PVP 2 g，加蒸馏水40ml，加1M Tris-cl（PH8.0）10ml，0.5M EDTA（PH 8.0）4ml和5M NaCl 28ml,待CTAB溶解后用蒸馏水定容到100ml（提取前加入2%的巯基乙醇，100ml加0.2ml巯基乙醇） |
7楼2013-07-12 17:37:29
oranzxc
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9楼2013-07-13 12:22:53
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