应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】求助-苯酚氯仿纯化DNA方法
131/2返回列表12下一页
查看: 3842  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

liyong1981

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】求助-苯酚氯仿纯化DNA方法 已有3人参与

求助-苯酚氯仿纯化DNA方法

哪位大仙有啊，我是纯化质粒用的，不是提取，谢谢了。貌似是先用苯酚氯仿，接着用氯仿，最后是用3M醋酸钠，多谢了。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-10-11 08:12:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yaojc

木虫 (正式写手)
看下分子克隆上册
赞一下 回复此楼
专注、专心、专业
2楼2010-10-11 08:24:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lixg

铁杆木虫 (正式写手)
★
liyong1981(金币+1): 2010-10-11 08:55:44
amisking(金币+1):鼓励交流！ 2010-10-11 19:51:42
1.苯酚氯仿抽提
2.接着用氯仿抽提
3.最后用2x无水乙醇、1/10体积的3M醋酸钠（pH5.4）或1/25体积的5M氯化钠沉淀。
4.70%乙醇清洗沉淀，干燥，回溶。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2010-10-11 08:28:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)
上面的说详细点呗，苯酚氯仿不是分层的么？
赞一下 回复此楼
4楼2010-10-11 08:41:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)
继续求助~
回复此楼
5楼2010-10-11 08:55:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)
dhd997:耐心等待高手解答吧。 2010-10-11 10:23:40
版主！
回复此楼
6楼2010-10-11 10:13:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xyls6868

新虫 (小有名气)
★
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-10-11 10:23:49
liyong1981(金币+3):多谢~ 2010-10-11 10:53:59
引用回帖:
Originally posted by liyong1981 at 2010-10-11 08:41:20:
上面的说详细点呗，苯酚氯仿不是分层的么？

分氯仿是互溶的，你所说的分层的上层是tris，因为我们所用的酚是tris饱和酚
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2010-10-11 10:19:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ben1147

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
liyong1981(金币+2): 2010-10-11 16:56:17
amisking(金币+3):good！ 2010-10-11 19:51:53
引用回帖:
Originally posted by liyong1981 at 2010-10-11 08:41:20:
上面的说详细点呗，苯酚氯仿不是分层的么？

苯酚溶于氯仿
可以直接买配好的酚氯仿，吸下层有机相使用。

如果要自己配，先吸Tris饱和酚（纯化RNA时用水饱和酚），吸下层黄色的（上层是tris缓冲液，起饱和和水封的作用）。和等体积氯仿混匀（异戊醇可加可不加，看心情）。由于苯酚里面有一定的水（tris缓冲液），所以这个混匀的体系是乳浊液，有的实验室直接就用这个乳浊液，有的实验室混匀后离心，弃掉上面的水相，用下层有机相（实际上就是把苯酚从水里萃取到氯仿里）。

两种方法都可以，毕竟那点水不起什么作用，无非是最后吸取的水相体积会变大一点
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2010-10-11 16:35:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王会征

铁杆木虫 (著名写手)
liyong1981(金币+1): 2010-10-11 17:38:48
你如果只是纯化DNA的话没必要加那么多东西，只需2倍体积（原始DNA体积）的无水乙醇和0.1倍体积的3M醋酸钠在-20度下2个小时再高速离心吸干上清溶解沉淀即可。
赞一下 回复此楼
9楼2010-10-11 17:31:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)
要加的，因为俺要去掉连接酶。，呵呵
赞一下 回复此楼
10楼2010-10-11 17:39:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 liyong1981 的主题更新
131/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 283求调剂 +8 小楼。 2026-03-12 11/550 2026-03-16 09:46 by 无际的草原
[考研] 267一志愿南京工业大学0817化工求调剂 +5 SUICHILD 2026-03-12 5/250 2026-03-14 14:53 by jean5056
[考研] 331求调剂（0703有机化学 +5 ZY-05 2026-03-13 6/300 2026-03-14 10:51 by Jy?
[考研] 085600材料与化工 326 求调剂 +5 热爱生活ing 2026-03-09 5/250 2026-03-14 02:39 by JourneyLucky
[考研] 295复试调剂 +5 简木ChuFront 2026-03-09 5/250 2026-03-14 01:29 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +6 yfihxh 2026-03-09 6/300 2026-03-14 01:18 by JourneyLucky
[考研] 265求调剂 +9 小木虫085600 2026-03-09 12/600 2026-03-14 01:11 by JourneyLucky
[考研] 307求调剂 +7 超级伊昂大王 2026-03-10 7/350 2026-03-14 00:49 by JourneyLucky
[考研] 材料工程,326分，求调剂 +6 KRSLSR 2026-03-10 6/300 2026-03-13 23:47 by JourneyLucky
[考研] 材料专硕288分求调剂 一志愿211 +4 在家想你 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:49 by JourneyLucky
[考研] 求材料调剂 +5 隔壁陈先生 2026-03-12 5/250 2026-03-13 22:03 by 星空星月
[考研] 材料工程调剂 +4 咪咪空空 2026-03-11 4/200 2026-03-13 19:57 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +7 18880831720 2026-03-11 7/350 2026-03-13 16:10 by JourneyLucky
[考研] 材料专硕350 求调剂 +4 王金科 2026-03-12 4/200 2026-03-13 16:02 by ruiyingmiao
[考研] 求调剂 +3 程雨杭 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:06 by JourneyLucky
[论文投稿] 投稿问题 5+4 星光灿烂xt 2026-03-12 6/300 2026-03-13 14:17 by god_tian
[考研] 0856化学工程280分求调剂 +4 shenzxsn 2026-03-11 4/200 2026-03-13 11:55 by ymwdoctor
[考研] 333求调剂 +3 152697 2026-03-12 4/200 2026-03-13 07:08 by Iveryant
[考研] 085602化工求调剂 +7 董boxing 2026-03-10 7/350 2026-03-10 17:07 by BruceLiu320
[考研] 一志愿：武汉理工，材料工程，英二数二 总分314 +3 2202020125 2026-03-10 4/200 2026-03-10 13:54 by xiongyaxuan
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭