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liyong1981
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[交流]
【求助/交流】求助-苯酚氯仿纯化DNA方法 已有3人参与
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求助-苯酚氯仿纯化DNA方法 哪位大仙有啊，我是纯化质粒用的，不是提取，谢谢了。貌似是先用苯酚氯仿，接着用氯仿，最后是用3M醋酸钠，多谢了。 |
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2楼2010-10-11 08:24:31
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liyong1981(金币+2): 2010-10-11 16:56:17
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liyong1981(金币+2): 2010-10-11 16:56:17
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苯酚溶于氯仿 可以直接买配好的酚氯仿，吸下层有机相使用。 如果要自己配，先吸Tris饱和酚（纯化RNA时用水饱和酚），吸下层黄色的（上层是tris缓冲液，起饱和和水封的作用）。和等体积氯仿混匀（异戊醇可加可不加，看心情）。由于苯酚里面有一定的水（tris缓冲液），所以这个混匀的体系是乳浊液，有的实验室直接就用这个乳浊液，有的实验室混匀后离心，弃掉上面的水相，用下层有机相（实际上就是把苯酚从水里萃取到氯仿里）。 两种方法都可以，毕竟那点水不起什么作用，无非是最后吸取的水相体积会变大一点 |
8楼2010-10-11 16:35:43
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