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新人小玥

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】Anti-phospho-p42/44 抗体使用求助 已有4人参与

请问有没有人用过Anti-phospho-p42/44 antibody?使用过程中有什么注意的地方?

我用这个抗体做过很多次WB,都做不出来,材料是拟南芥,抗体购于cell signaling technology。

转膜都觉得有东西,加入一抗4度过夜,然后二抗1h。


高人能否指点几招?我应如何改进?
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wj_21cn

木虫 (正式写手)

★
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这个一抗可以用于植物么?
貌似是针对动物多吧。

还有就是,能确定磷酸化了么、
2楼2010-06-04 18:23:26
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新人小玥

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by wj_21cn at 2010-06-04 18:23:26:
这个一抗可以用于植物么?
貌似是针对动物多吧。

还有就是,能确定磷酸化了么、

用于植物没有问题,已经有很多在拟南芥中的报道。

那么如何确定是否磷酸化了呢?
3楼2010-06-05 08:51:14
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ben1147

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 新人小玥 at 2010-06-05 08:51:14:



用于植物没有问题,已经有很多在拟南芥中的报道。

那么如何确定是否磷酸化了呢?

就是说要确定你测量的对象可以磷酸化,并且在你的提取液中存在磷酸化状态
4楼2010-06-05 09:28:39
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新人小玥

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by ben1147 at 2010-06-05 09:28:39:

就是说要确定你测量的对象可以磷酸化,并且在你的提取液中存在磷酸化状态

我明白,但是我可以用什么样的方法来验证提取液中存在磷酸化状态?
5楼2010-06-06 08:42:22
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张力民1598

铜虫 (小有名气)

★
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貌似提取样品要加磷酸酶抑制剂
6楼2010-06-06 09:43:09
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新人小玥

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 张力民1598 at 2010-06-06 09:43:09:
貌似提取样品要加磷酸酶抑制剂

谢谢!我试试。
7楼2010-06-06 20:36:16
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