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playboy723

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
liyong1981(金币+1): 2010-10-11 08:55:44
amisking(金币+1):鼓励交流！ 2010-10-11 19:51:42

1.苯酚氯仿抽提
2.接着用氯仿抽提
3.最后用2x无水乙醇、1/10体积的3M醋酸钠（pH5.4）或1/25体积的5M氯化钠沉淀。
4.70%乙醇清洗沉淀，干燥，回溶。
这个回答是对的。
另外你干嘛要去连接酶？你在做载体构建吗？如果是的话没有必要去连接酶啊   16°连接过夜后直接将连接产物加到感受态中就可以了，没有必要再抽提的   本来就不多抽完估计也没了，再说连接酶我没发现会影响转化效率的
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11楼2010-10-12 12:14:00
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ben1147

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by liyong1981 at 2010-10-11 17:39:09:
要加的，因为俺要去掉连接酶。，呵呵

如果是连接产物做转化，可以不用抽提，直接转。65度保温10min失活连接酶可以提高转化率，但并非必须
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12楼2010-10-12 12:29:22
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liyong1981

金虫 (正式写手)
电转化，做库，去掉总好些吧~
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13楼2010-10-12 13:22:51
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