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liyong1981

金虫 (正式写手)


[交流] 【求助/交流】求助-苯酚氯仿纯化DNA方法 已有3人参与

求助-苯酚氯仿纯化DNA方法

哪位大仙有啊,我是纯化质粒用的,不是提取,谢谢了。貌似是先用苯酚氯仿,接着用氯仿,最后是用3M醋酸钠,多谢了。
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playboy723

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
liyong1981(金币+1): 2010-10-11 08:55:44
amisking(金币+1):鼓励交流! 2010-10-11 19:51:42

1.苯酚氯仿抽提
2.接着用氯仿抽提
3.最后用2x无水乙醇、1/10体积的3M醋酸钠(pH5.4)或1/25体积的5M氯化钠沉淀。
4.70%乙醇清洗沉淀,干燥,回溶。
这个回答是对的。
另外你干嘛要去连接酶?你在做载体构建吗?如果是的话没有必要去连接酶啊   16°连接过夜后直接将连接产物加到感受态中就可以了,没有必要再抽提的   本来就不多抽完估计也没了,再说连接酶我没发现会影响转化效率的
11楼2010-10-12 12:14:00
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yaojc

木虫 (正式写手)

看下分子克隆上册
专注、专心、专业
2楼2010-10-11 08:24:31
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lixg

铁杆木虫 (正式写手)


liyong1981(金币+1): 2010-10-11 08:55:44
amisking(金币+1):鼓励交流! 2010-10-11 19:51:42
1.苯酚氯仿抽提
2.接着用氯仿抽提
3.最后用2x无水乙醇、1/10体积的3M醋酸钠(pH5.4)或1/25体积的5M氯化钠沉淀。
4.70%乙醇清洗沉淀,干燥,回溶。
3楼2010-10-11 08:28:12
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liyong1981

金虫 (正式写手)


上面的说详细点呗,苯酚氯仿不是分层的么?
4楼2010-10-11 08:41:20
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