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liyong1981

金虫 (正式写手)

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[交流] 【求助/交流】求助-苯酚氯仿纯化DNA方法已有3人参与

求助-苯酚氯仿纯化DNA方法

哪位大仙有啊，我是纯化质粒用的，不是提取，谢谢了。貌似是先用苯酚氯仿，接着用氯仿，最后是用3M醋酸钠，多谢了。

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1楼 2010-10-11 08:12:57

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playboy723

金虫 (正式写手)

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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

liyong1981(金币+1): 2010-10-11 08:55:44
amisking(金币+1):鼓励交流！ 2010-10-11 19:51:42

1.苯酚氯仿抽提
2.接着用氯仿抽提
3.最后用2x无水乙醇、1/10体积的3M醋酸钠（pH5.4）或1/25体积的5M氯化钠沉淀。
4.70%乙醇清洗沉淀，干燥，回溶。
这个回答是对的。
另外你干嘛要去连接酶？你在做载体构建吗？如果是的话没有必要去连接酶啊 16°连接过夜后直接将连接产物加到感受态中就可以了，没有必要再抽提的本来就不多抽完估计也没了，再说连接酶我没发现会影响转化效率的