应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » DNA纯化试剂盒原理
81/1返回列表
查看: 2206  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

西方巍巍

金虫 (小有名气)

[求助] DNA纯化试剂盒原理

刚参加实验，做了DNA纯化，想明白原理，望大牛指教，步骤如下：
1）取10-20微升液体培养的细菌到1.5ml离心管中，加入200微升保护液。
2) 加入10 μL充分悬浮的硅珠悬液，充分混匀，室温放置5 min，期间摇匀2~3次；
3) 10000 rpm室温离心15 s，去上清，再离心5 s，吸干残余液体；
4) 加入200 μL 洗涤液，使白色沉淀充分悬浮；
5) 10000 rpm室温离心15 s，去上清，重复步骤5；
6) 10000 rpm室温离心15 s，去上清，再离心30 s，吸干残余液体，超净台中开盖干燥5 min；
7) 加入约10 μL重蒸水，使硅珠充分悬浮，静置2 min；
8) 13000 rpm室温离心1 min，小心吸取上清至干净无菌的离心管中。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-08-01 16:14:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gungunak47

铁虫 (初入文坛)
不知道楼主用的是 哪家的硅珠
赞一下 回复此楼
2楼2012-08-06 14:56:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流经验 2012-08-09 14:18:50
硅珠在法医学上最为常用的。
硅珠用来吸附DNA。
洗涤液用来去除杂质溶剂，例如保护液等。
最后加水将DNA溶解，离心后其上清里就含有你需要的DNA。
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

西方巍巍
3楼2012-08-06 18:56:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西方巍巍

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gungunak47 at 2012-08-06 14:56:14
不知道楼主用的是 哪家的硅珠

KIt
4楼2012-08-08 15:34:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西方巍巍

金虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by chenguestc at 2012-08-06 18:56:55
硅珠在法医学上最为常用的。
硅珠用来吸附DNA。
洗涤液用来去除杂质溶剂，例如保护液等。
最后加水将DNA溶解，离心后其上清里就含有你需要的DNA。

再问一下，最后得到的DNA样品，检测拉曼光谱，谱峰跟正常的DNA不一样，后来比对保护液和洗涤液发现是他们两者的谱峰，如何才能将DNA中的杂质完全去除，重蒸水多洗几次？
赞一下 回复此楼
5楼2012-08-08 15:37:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流了 2012-08-09 14:19:03
如果去除杂质，在洗脱DNA前，可以多洗涤一次到两次。其实楼主可以买普通DNA纯化试剂盒如果试验不是非常精确的话，也挺便宜的。如果已经洗脱还有杂质，就只有再次用氯仿异戊醇等将DNA沉淀后，再洗涤，再溶解。
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

西方巍巍
6楼2012-08-08 17:11:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西方巍巍

金虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by chenguestc at 2012-08-08 17:11:05
如果去除杂质，在洗脱DNA前，可以多洗涤一次到两次。其实楼主可以买普通DNA纯化试剂盒如果试验不是非常精确的话，也挺便宜的。如果已经洗脱还有杂质，就只有再次用氯仿异戊醇等将DNA沉淀后，再洗涤，再溶解。

问洗涤液怎么最后去除，重蒸水多洗？我的实验猜测可能是DNA相对量较少，并且不容易和拉曼增强的AgNP结合，所以出来的谱峰是保护剂和洗涤剂的
赞一下 回复此楼
7楼2012-08-09 09:01:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-08-09 14:19:17
西方巍巍: 金币+10, ★★★很有帮助 2012-08-10 16:50:07
引用回帖:
7楼: Originally posted by 西方巍巍 at 2012-08-09 09:01:28
问洗涤液怎么最后去除，重蒸水多洗？我的实验猜测可能是DNA相对量较少，并且不容易和拉曼增强的AgNP结合，所以出来的谱峰是保护剂和洗涤剂的...

具体哪个洗涤液成分是什么不清楚，肯定不能用水洗，DNA是溶解于水的，如果用水洗，最后很有可能得不到DNA.  我猜洗涤液里应该有乙醇，有可能是75%的乙醇或许还有其他添加就不清楚了。常规的DNA提取最后洗涤都是用75%乙醇。
赞一下 回复此楼
8楼2012-08-09 11:30:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 西方巍巍 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 293求调剂 +3 勇远库爱314 2026-04-08 3/150 2026-04-09 15:51 by wp06
[考研] 材料工程085601，270求调剂 +26 @ASDF1234 2026-04-08 28/1400 2026-04-09 15:47 by wp06
[考研] 复试调剂，一志愿郑州大学材料与化工289分 +30 硕星赴 2026-04-08 30/1500 2026-04-09 15:43 by only周
[考研] 初试分332，一志愿报考西北工业大学， +7 故人?? 2026-04-09 7/350 2026-04-09 15:04 by 猪会飞
[考博] 博士自荐 +3 可可小胖 2026-04-08 3/150 2026-04-09 11:25 by juanzi_88
[考研] 一志愿0703化学招61最终排名62化学求调剂 +13 招61排名62 2026-04-07 15/750 2026-04-08 23:06 by 招61排名62
[考研] 一志愿211，化学学硕，310分，本科重点双非，求调剂 +10 努力奋斗112 2026-04-07 10/500 2026-04-08 15:01 by screening
[考研] 307求调剂 +14 超级伊昂大王 2026-04-06 14/700 2026-04-08 07:03 by 无际的草原
[考研] 本科生物信息学，总分362 求07 08调剂 +6 q小倩1210 2026-04-06 6/300 2026-04-07 19:40 by macy2011
[考研] 325 调剂 +6 QQ小虾 2026-04-07 6/300 2026-04-07 15:17 by Ccclqqq
[论文投稿] Decision: Revise for Editor还会送审吗 100+3 CccccccccFD 2026-04-04 5/250 2026-04-07 10:58 by 北京莱茵润色
[考研] 一志愿 江南大学 085602 化工专硕 338分求调剂 +15 路痴小琪 2026-04-05 15/750 2026-04-06 09:27 by cql1109
[考研] 0860 求调剂 一志愿国科大 348 分 +3 WiiiP 2026-04-03 3/150 2026-04-05 17:43 by Ecowxq666！
[考研] 083200 333求调剂 +3 十二！！ 2026-04-04 3/150 2026-04-05 08:28 by barlinike
[考研] 278求调剂 +14 范婷娜 2026-04-04 15/750 2026-04-04 22:15 by lqwchd
[考研] 求调剂 +3 农业工程与信息� 2026-04-04 3/150 2026-04-04 12:19 by 舍而后得
[考研] 266求调剂 +8 学员97LZgn 2026-04-03 8/400 2026-04-04 09:02 by 20021109
[考研] 一志愿中国石油大学化学工程323分求调剂 +4 化工专硕323分 2026-04-03 6/300 2026-04-03 22:12 by dongzh2009
[考研] 一志愿重庆大学085404，总分314分，求调剂 +4 zf83hn 2026-04-03 4/200 2026-04-03 21:25 by 啵啵啵0119
[硕博家园] 求老师收留 +9 lllq123 2026-04-03 9/450 2026-04-03 13:48 by 呼吸都是减肥
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭