24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 2212  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

西方巍巍

金虫 (小有名气)

[求助] DNA纯化试剂盒原理

刚参加实验,做了DNA纯化,想明白原理,望大牛指教,步骤如下:
1)取10-20微升液体培养的细菌到1.5ml离心管中,加入200微升保护液。
2) 加入10 μL充分悬浮的硅珠悬液,充分混匀,室温放置5 min,期间摇匀2~3次;
3) 10000 rpm室温离心15 s,去上清,再离心5 s,吸干残余液体;
4) 加入200 μL 洗涤液,使白色沉淀充分悬浮;
5) 10000 rpm室温离心15 s,去上清,重复步骤5;
6) 10000 rpm室温离心15 s,去上清,再离心30 s,吸干残余液体,超净台中开盖干燥5 min;
7) 加入约10 μL重蒸水,使硅珠充分悬浮,静置2 min;
8) 13000 rpm室温离心1 min,小心吸取上清至干净无菌的离心管中。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西方巍巍

金虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by chenguestc at 2012-08-08 17:11:05
如果去除杂质,在洗脱DNA前,可以多洗涤一次到两次。其实楼主可以买普通DNA纯化试剂盒如果试验不是非常精确的话,也挺便宜的。如果已经洗脱还有杂质,就只有再次用氯仿异戊醇等将DNA沉淀后,再洗涤,再溶解。

问洗涤液怎么最后去除,重蒸水多洗?我的实验猜测可能是DNA相对量较少,并且不容易和拉曼增强的AgNP结合,所以出来的谱峰是保护剂和洗涤剂的
7楼2012-08-09 09:01:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

gungunak47

铁虫 (初入文坛)


不知道楼主用的是 哪家的硅珠
2楼2012-08-06 14:56:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流经验 2012-08-09 14:18:50
硅珠在法医学上最为常用的。
硅珠用来吸附DNA。
洗涤液用来去除杂质溶剂,例如保护液等。
最后加水将DNA溶解,离心后其上清里就含有你需要的DNA。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2012-08-06 18:56:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西方巍巍

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gungunak47 at 2012-08-06 14:56:14
不知道楼主用的是 哪家的硅珠

KIt
4楼2012-08-08 15:34:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 311求调剂 +9 xyp想读书 2026-04-10 10/500 2026-04-10 11:34 by 高维春
[考研] 药学专硕调剂 +4 ? 一路生?花? 2026-04-10 5/250 2026-04-10 11:13 by 求调剂zz
[考研] 273求调剂 +46 麦小叮当 2026-04-06 53/2650 2026-04-10 10:02 by cyh—315
[考研] 268分085602化学工程调剂 +24 月照花林。 2026-04-09 24/1200 2026-04-10 08:09 by Sammy2
[考研] 0703化学 +31 妮妮ninicgb 2026-04-04 35/1750 2026-04-09 21:06 by zhouxiaoyu
[考研] 求调剂材料科学与工程一志愿985初试365分 +5 材化李可 2026-04-08 5/250 2026-04-09 17:00 by Lilly_Li
[论文投稿] 求助文献原文 10+3 18500821399 2026-04-08 3/150 2026-04-09 16:56 by 北京莱茵润色
[考研] 085501机械专硕 302分 不挑专业求调剂 +5 汪某. 2026-04-09 5/250 2026-04-09 15:38 by 蒋皓禹
[考研] 求调剂,262机械专硕 +6 嗯yyl 2026-04-08 6/300 2026-04-09 12:01 by zhouyuwinner
[考研] 280求调剂 +5 兮兮夜夜 2026-04-09 8/400 2026-04-09 11:15 by 兮兮夜夜
[考研] 材料307分求大佬组收留 +17 Hll胡 2026-04-07 17/850 2026-04-09 10:53 by liuhuiying09
[考研] 334求调剂 +16 Riot2025 2026-04-08 17/850 2026-04-09 09:28 by wdyheheeh
[考研] 材料专硕(0856) 339分求调剂 +16 哈哈哈鹅哈哈哈 2026-04-05 16/800 2026-04-08 16:02 by luoyongfeng
[考研] 调剂 +3 电气300求调剂不 2026-04-08 6/300 2026-04-08 09:39 by 电气300求调剂不
[考研] 362求调剂一志愿中国石油大学 +4 我要考大 2026-04-06 6/300 2026-04-06 14:11 by 无际的草原
[考研] 求调剂 +5 wos666 2026-04-03 5/250 2026-04-06 10:13 by 蓝云思雨
[考研] 考研生物学考A区211,初试322,科目生化和生物综合,求调剂 +6 。。。54 2026-04-03 6/300 2026-04-05 14:54 by JOKER0401
[考研] 278求调剂 +6 Yy7400 2026-04-03 6/300 2026-04-04 09:53 by zhangdingwa
[考研] 268求调剂 +8 你好tg 2026-04-03 9/450 2026-04-04 05:08 by gswylq
[考研] 求调剂 +4 压力??大 2026-04-03 4/200 2026-04-03 21:36 by 啵啵啵0119
信息提示
请填处理意见