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崔永霞

铁虫 (小有名气)

[求助] DNA的提取和纯化

各位高手我最近在提DNA,刚刚接触,大家有没有人知道DNA提取过程中的PVP和tris-饱和酚的作用是什么啊,可不可以给我说一说啊?
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每个人都有心底最柔软的地方,请不要触碰它,因为每个人都有自己的尊严!
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崔永霞

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by hyc_charles at 2013-07-12 17:37:29
PVP的用途主要是在配置CTAB时用的,你使用改良的CTAB法提取DNA的嘛?
CTAB 提取液(PH 8.0)的配方如下:称取CTAB 2 g,PVP 2 g,加蒸馏水40ml,加1M Tris-cl(PH8.0)10ml,0.5M EDTA(PH 8.0)4ml和5M NaCl 28m ...

弱弱的问一句,CTAB 提取液(PH 8.0)的配方不是就是加1M Tris-cl(PH8.0)10ml,0.5M EDTA(PH 8.0)4ml和5M NaCl 28ml然后定容到100ml吗?怎么还会有CTAB2g呢?
每个人都有心底最柔软的地方,请不要触碰它,因为每个人都有自己的尊严!
8楼2013-07-13 11:56:28
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oranzxc

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
崔永霞(myprayer代发): 金币+1, Gifts of roses, there are lingering fragrance. Look forward to your wonderful and more detailed answer. 2013-07-12 10:48:55
崔永霞: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-07-12 16:20:28
酚是使蛋白变性并抽提蛋白的,还能使DNase丧失功能
PVP是抽提多糖和多酚的,包括植物本身还有的酚类
2楼2013-07-12 10:32:38
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电电的开始

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
崔永霞: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-07-12 16:19:40
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-07-13 15:23:30
Tris饱和酚一般PH大于7.8,用于DNA的提取。其中,酚是强的蛋白变性剂,可以使细胞或组织中的蛋白质变性析出。而Tris的主要作用是防治止酚类氧化,若酚类氧化,则会形成醌(两个苯环),醌含有强自由基,会破坏核酸结构,Tris-HCl (pH8.0)提供一个缓冲环境,防止核酸被破坏。 同时,由于PH值大于7,在碱性环境中DNA处于水相,RNA处于有机相。从而分离上清,即可得到DNA。
PVPPVP(聚乙烯吡咯烷酮)是酚的络合物,能与多酚形成一种不溶的络合物质,有效去除多酚,减少DNA中酚的污染;同时它也能和多糖结合,有效去除多糖.
为自己而开始
3楼2013-07-12 11:30:36
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御风(远)

新虫 (初入文坛)

如3楼所述,
4楼2013-07-12 15:34:53
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