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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 提取RNA的试剂盒哪家的好？
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fmtzhangli

金虫 (小有名气)

[求助] 提取RNA的试剂盒哪家的好？ 已有2人参与

我一直在做提取真菌的RNA，RT—pcr，但由于提取的RNA中有DNA污染，所以一直做不出实验结果。哪位高手做过类似实验，给我推荐一个好点的提取RNA的试剂盒~~提取成功率比较高的~~~谢谢啦

[ Last edited by fmtzhangli on 2012-5-31 at 14:05 ]
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1楼 2012-05-31 13:16:14
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

wanghd2826

铁虫 (小有名气)
★ ★
西瓜: 金币+2, 鼓励应助 2012-06-03 23:59:50
其实有DNA污染没啥问题，用RNA酶消化下即可。试剂盒的好坏其实主要还是看提取的28s和18s两条带完不完整，有DNA污染很正常。严格来说，提取完RNA都要经过DNA酶纯化的，不管跑胶看不看得到DNA条带。
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4楼2012-05-31 16:20:52
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hlstrive

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我们用的是天根的，效果还行。
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2楼2012-05-31 14:39:21
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植物园园长

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-05-31 17:14:50
天根的效果不错。
可以用植物RNAprep试剂盒来做，如果你的真菌是多糖类的样本，可以在订购试剂盒的时候免费要一个HL的裂解液替代试剂盒中的标准裂解液，效果更好。
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在路上～～Marketing!
3楼2012-05-31 15:38:31
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陈朵朵

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+1, 鼓励 2012-06-03 23:59:59
我提嗜热丝孢菌（属于真菌）的RNA采用的是天根 quant 一步法RT-PCR试剂盒（当然是在反转录PCR时才用），你的有DNA污染 很可能是在加入氯仿后离心，吸上清的过程中带入的，这一过程必须宁缺毋滥，宁可少吸一点上清，也不要把下面的DNA混入进去了。
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5楼2012-05-31 19:53:31
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我是小纯洁

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
invitrogen的trizol，按步骤来，不会有DNA污染的。
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6楼2012-06-03 11:29:43
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fmtzhangli

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 我是小纯洁 at 2012-06-03 11:29:43
invitrogen的trizol，按步骤来，不会有DNA污染的。

那个适用于真菌吗？我看好像是提植物的RNA的。。。
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7楼2012-06-03 19:50:22
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我是小纯洁

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by fmtzhangli at 2012-06-03 19:50:22
那个适用于真菌吗？我看好像是提植物的RNA的。。。...

你确定你看过说明书了？
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8楼2012-06-03 22:10:50
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longrna

新虫 (正式写手)
Trizol适用性较为广泛，植物、动物、细胞、真菌都可做。具体物种效果不一。
推荐ambion的DNase I。
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伟大航线....
9楼2012-06-04 16:36:29
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张博

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-06-05 14:03:52
我的材料多酚、多糖比较多，用的华越洋的试剂盒提RNA，和纯化的步骤一起，既简单有便宜，效果也挺好的，强烈推荐。。
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10楼2012-06-04 20:22:10
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