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fmtzhangli

金虫 (小有名气)

[求助] 提取RNA的试剂盒哪家的好?已有2人参与

我一直在做提取真菌的RNA,RT—pcr,但由于提取的RNA中有DNA污染,所以一直做不出实验结果。哪位高手做过类似实验,给我推荐一个好点的提取RNA的试剂盒~~提取成功率比较高的~~~谢谢啦

[ Last edited by fmtzhangli on 2012-5-31 at 14:05 ]
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wanghd2826

铁虫 (小有名气)

★ ★
西瓜: 金币+2, 鼓励应助 2012-06-03 23:59:50
其实有DNA污染没啥问题,用RNA酶消化下即可。试剂盒的好坏其实主要还是看提取的28s和18s两条带完不完整,有DNA污染很正常。严格来说,提取完RNA都要经过DNA酶纯化的,不管跑胶看不看得到DNA条带。
4楼2012-05-31 16:20:52
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普通回帖

hlstrive

铜虫 (初入文坛)


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我们用的是天根的,效果还行。
2楼2012-05-31 14:39:21
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植物园园长

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-05-31 17:14:50
天根的效果不错。
可以用植物RNAprep试剂盒来做,如果你的真菌是多糖类的样本,可以在订购试剂盒的时候免费要一个HL的裂解液替代试剂盒中的标准裂解液,效果更好。
在路上~~Marketing!
3楼2012-05-31 15:38:31
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陈朵朵

银虫 (初入文坛)

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西瓜: 金币+1, 鼓励 2012-06-03 23:59:59
我提嗜热丝孢菌(属于真菌)的RNA采用的是天根 quant 一步法RT-PCR试剂盒(当然是在反转录PCR时才用),你的有DNA污染 很可能是在加入氯仿后离心,吸上清的过程中带入的,这一过程必须宁缺毋滥,宁可少吸一点上清,也不要把下面的DNA混入进去了。
5楼2012-05-31 19:53:31
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我是小纯洁

金虫 (正式写手)

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invitrogen的trizol,按步骤来,不会有DNA污染的。
6楼2012-06-03 11:29:43
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fmtzhangli

金虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 我是小纯洁 at 2012-06-03 11:29:43
invitrogen的trizol,按步骤来,不会有DNA污染的。

那个适用于真菌吗?我看好像是提植物的RNA的。。。
7楼2012-06-03 19:50:22
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我是小纯洁

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by fmtzhangli at 2012-06-03 19:50:22
那个适用于真菌吗?我看好像是提植物的RNA的。。。...

你确定你看过说明书了?
8楼2012-06-03 22:10:50
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longrna

新虫 (正式写手)

Trizol适用性较为广泛,植物、动物、细胞、真菌都可做。具体物种效果不一。
推荐ambion的DNase I。
伟大航线....
9楼2012-06-04 16:36:29
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张博

新虫 (初入文坛)

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小丹木木: 金币+1, 鼓励交流 2012-06-05 14:03:52
我的材料多酚、多糖比较多,用的华越洋的试剂盒提RNA,和纯化的步骤一起,既简单有便宜,效果也挺好的,强烈推荐。。
10楼2012-06-04 20:22:10
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