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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】提总的RNA的试剂是RNAiso效果好还是Trizol效果好
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诺曼底1227

铁杆木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】提总的RNA的试剂是RNAiso效果好还是Trizol效果好

想做RT-PCR，但目前查到一些资料说提细胞总的RNA主要有两种，一个是TakaRa公司的RNAiso，还有一个是invitrogen公司的Trizol，但就是不知道这两种试剂哪种提出来的比较好？我做的细胞是hBMSC，多谢各位了
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1楼2010-12-22 16:18:58
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bigbangrex

铁杆木虫 (小有名气)
★
诺曼底1227(金币+1):谢谢参与
我想可能trizol用的人多一点吧。
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2楼2010-12-22 16:51:43
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dianaofyezi

金虫 (正式写手)
★
诺曼底1227(金币+1):谢谢参与
RNAiso没有用过，但是Trizol还可以，也可以用试剂盒提。
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3楼2010-12-22 17:44:02
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
诺曼底1227(金币+1):谢谢参与
Trizol是最经典最有保障的
其他的都是仿制的
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4楼2010-12-22 17:54:56
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yj-lzx

荣誉版主 (文坛精英)
★
诺曼底1227(金币+1):谢谢参与
只用过trizol~~~
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5楼2010-12-22 21:37:32
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dhd997

荣誉版主 (文坛精英)
★
诺曼底1227(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by yj-lzx at 2010-12-22 21:37:32:
只用过trizol~~~

欢迎多来交流哦
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6楼2010-12-22 21:38:25
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yj-lzx

荣誉版主 (文坛精英)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by dhd997 at 2010-12-22 21:38:25:

欢迎多来交流哦

哎~~~我们提牛的RNA两次都失败了~~~
借了条隔壁实验室的鱼就可以~~~
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7楼2010-12-22 21:43:38
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rioarsenal

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+1):鼓励积极参与~~~ 2010-12-23 15:09:24
两种都用过，我们一般提植物的，都比较好用啊，不过宝生物的试剂要便宜一些的。
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8楼2010-12-23 13:21:48
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sweetbobo

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我用Rnaiso 用于微生物rna提取 nice
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9楼2010-12-23 23:52:02
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lixg

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
trizol就很好用啊，CTAB法也不错。
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10楼2010-12-24 08:25:39
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321wangke321

金虫 (正式写手)

RNA

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+1): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-03-07 19:44:18
我用Trizol提植物的，效果还行，就是不知道哪家公司的要便宜些
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11楼2010-12-24 13:28:57
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sanmaoecho

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+1): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-03-07 19:44:13
之前一直用invitrogen公司的Trizol，效果不错，试剂盒更方便一些，现在用TakaRa公司的RNAiso，也可以
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12楼2010-12-24 14:43:43
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jerry110

新虫 (小有名气)
trizol就行的，另一个没用过
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13楼2010-12-27 10:42:31
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cond

银虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+1): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-03-07 19:44:27
我试提过水稻叶片，trizol好
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14楼2010-12-27 21:41:59
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cond

银虫 (正式写手)
我试提过水稻叶片，trizol好
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15楼2010-12-27 21:42:47
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arc2360

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by sweetbobo at 2010-12-23 23:52:02:
我用Rnaiso 用于微生物rna提取 nice

请教大虾，我用RNAiso提取革兰氏阳性菌，提出的RNA检测260/280在1.4-1.6之间，能帮我分析下吗？电泳图也没跑出条带
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16楼2011-03-05 11:20:54
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dingxiuying

木虫 (正式写手)
提植物的，用trizol kit。
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17楼2011-03-07 16:21:09
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wqj1988926

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+1): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-03-07 19:44:38
trizol吧，一直用的，效果不错
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18楼2011-03-07 16:33:20
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genomelin

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+1): 鼓励积极参与交流~~~ 2011-03-07 19:44:43
用trizol 裂解，然后用上清过invitrogen 的total RNA kit ，最后洗脱的时候可以顺便直接加DNase处理，得到的RNA质量很好。如果对于RNA片段长短有特别精细的要求（RNA-seq），用trizol，避免过柱造成的剪切力对于RNA的损害。
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19楼2011-03-07 18:23:53
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cjf2008njau

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我们实验室提RNA用的是SunShineBio总RNA提取试剂，说白了，估计也就是Trizol试剂的成分，不过提取的效果还真不错。。。国产的，也不贵。用这提的RNA,做RT-PCR够用了
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20楼2011-03-07 21:57:18
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hardytam

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
两种都用过，但个人觉得trizol的效果更稳定，迫不得已RNAiso也可以。
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21楼2013-07-14 11:12:11
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千里鼠0609

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
首先，同做RNA的虫子朱楼主好运，我提的是植物材料，富含多糖多酚，所以用RNAiso的效果相对较好，Trizol基本提不出来······都是色素和被氧化产生 黑色块状物··但，一般情况大多数人用的都是Trizol,所以，楼主还是根据材料情况来判断吧
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22楼2013-07-15 17:04:01
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liua

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
22楼: Originally posted by 千里鼠0609 at 2013-07-15 17:04:01
首先，同做RNA的虫子朱楼主好运，我提的是植物材料，富含多糖多酚，所以用RNAiso的效果相对较好，Trizol基本提不出来······都是色素和被氧化产生 黑色块状物··但，一般情况大多数人用的都是Trizol,所以，楼 ...

请问你提的是什么植物材料啊，我用RNAiso提取水葫芦叶提不出来啊，提取根部的能提出来
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23楼2013-07-15 18:46:04
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千里鼠0609

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
23楼: Originally posted by liua at 2013-07-15 18:46:04
请问你提的是什么植物材料啊，我用RNAiso提取水葫芦叶提不出来啊，提取根部的能提出来...

我是松树的茎干部。
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24楼2013-07-16 13:26:28
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sheepdawn

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
9楼: Originally posted by sweetbobo at 2010-12-23 23:52:02
我用Rnaiso 用于微生物rna提取 nice

请问用Rnaiso提取细菌总RNA的时候，做之前细菌需要研磨吗，我用的是革兰氏阴性菌？
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25楼2014-07-18 17:55:52
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sheepdawn

木虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by sanmaoecho at 2010-12-24 14:43:43
之前一直用invitrogen公司的Trizol，效果不错，试剂盒更方便一些，现在用TakaRa公司的RNAiso，也可以

请问用TakaRa公司的RNAiso提取细菌总RNA，需要研磨菌体吗，还是离心后直接做？
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26楼2014-07-18 17:57:26
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sheepdawn

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
21楼: Originally posted by hardytam at 2013-07-14 11:12:11
两种都用过，但个人觉得trizol的效果更稳定，迫不得已RNAiso也可以。

请问用TakaRa公司的RNAiso提取细菌总RNA，需要研磨菌体吗，还是离心后直接做？
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27楼2014-07-18 17:57:56
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sweetbobo

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
25楼: Originally posted by sheepdawn at 2014-07-18 17:55:52
请问用Rnaiso提取细菌总RNA的时候，做之前细菌需要研磨吗，我用的是革兰氏阴性菌？...

革兰氏阴性菌一般情况是不要研磨
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28楼2014-07-22 13:40:27
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sheepdawn

木虫 (小有名气)
★
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28楼: Originally posted by sweetbobo at 2014-07-22 13:40:27
革兰氏阴性菌一般情况是不要研磨...

您好，那我提出来RNA的浓度测了之后260/280=0.46,260/230=0.31,浓度是102ng/μL,这么低的原因是什么？我做的时候还有无酶的塑料研磨棒磨了一会儿的，菌体的量的离心后也看得非常明显，但是测出来值很低，用的管子枪头也都是无酶的。
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29楼2014-07-22 16:15:48
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sweetbobo

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
29楼: Originally posted by sheepdawn at 2014-07-22 16:15:48
您好，那我提出来RNA的浓度测了之后260/280=0.46,260/230=0.31,浓度是102ng/μL,这么低的原因是什么？我做的时候还有无酶的塑料研磨棒磨了一会儿的，菌体的量的离心后也看得非常明显，但是测出来值很低，用的管子枪 ...

R值260/280最佳是2.0， 一般是1.8—2.2间，说明你的RNA质量非常差，浓度也不高。
抽RNA最重要是菌体破碎，假若机械破碎最好是1分钟内完成，而且保证Rnase Free。我建议你使用震荡破碎仪FastPrep-24  Automated  system  (MP  Biomedicals
Solon,  OH,  USA)。
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30楼2014-07-25 14:39:23
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sheepdawn

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
30楼: Originally posted by sweetbobo at 2014-07-25 14:39:23
R值260/280最佳是2.0， 一般是1.8—2.2间，说明你的RNA质量非常差，浓度也不高。
抽RNA最重要是菌体破碎，假若机械破碎最好是1分钟内完成，而且保证Rnase Free。我建议你使用震荡破碎仪FastPrep-24  Automated  s ...

好的，谢谢，后面没有研磨，直接加了Plus之后用移液枪反复吹打，260/280=1.74，260ng/μL，比上次稍微好一些。
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31楼2014-07-26 10:56:01
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啦啦啦23456

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
22楼: Originally posted by 千里鼠0609 at 2013-07-15 17:04:01
首先，同做RNA的虫子朱楼主好运，我提的是植物材料，富含多糖多酚，所以用RNAiso的效果相对较好，Trizol基本提不出来······都是色素和被氧化产生 黑色块状物··但，一般情况大多数人用的都是Trizol,所以，楼 ...

楼主提取的是什么？我用的也是RNAiso，提取的是有色米，结果最后加一半体积的异丙醇，一半体积的高盐溶液，没有沉淀，只有分层，这个是什么原因啊？
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32楼2017-11-06 23:50:33
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