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stickforver银虫 (小有名气)
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用试剂盒植物基因组DNA提取原理
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| 本人第一次提植物基因组DNA，用的是天根的试剂盒，对于其中的一些具体原理不是很了解，比如各溶液中的有效成分是什么，作用有哪些？希望有经验的各位人士帮忙解答，越详细越好。谢谢！ |
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2楼2012-12-07 21:47:35
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查资料，发现通常裂解细胞时用到SDS或CATB，可是将细胞裂解后是依据什么除去蛋白质的。之前做过用试剂盒提质粒，这个过程除去蛋白质的方法好像是通过加入KAC将SDS-Na转变为SDS-K，溶解度降低，析出沉淀，此时基因组DNA因为分子量大，连同蛋白一起沉淀，而质粒较小不沉淀。那么在提植物标基因组DNA时我们要的是分子量大的基因组DNA，要怎么保证即除去蛋白质又能保留住基因组DNA？还有在提基因组DNA时分子量相对较小的叶绿体DNA和线粒体DNA会被提出来吗？在查资料时还发现，在提基因组DNA时（不是用试剂盒）有一种方法是加入蛋白酶K用来出除去蛋白质,可是体系中有SDS，蛋白酶K怎么能保持活性呢？现在脑袋很晕，理不清思路，希望大家帮忙理理。。。 |
3楼2012-12-08 12:15:59
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4楼2012-12-09 09:46:56
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5楼2012-12-10 20:37:24