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pidou213

木虫 (正式写手)


[交流] 【求助/交流】DNA提取

本人提取昆虫的DNA,每次都不成功。不知道为何?

下面的部分(从左至右依次为lane1 DNA; lane2 DNA;Lane 3 Marker(Trans 2K plus))不知道中间的那条隐约的条带是不是DNA?可否用来做后续PCR?


这种情况的原因是什么?

请虫虫们指正。
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xiaoqi708

木虫 (正式写手)


★ ★
pidou213(金币+3):谢谢回复,能否再帮助回答一下下面的问题? 2011-01-05 22:48:01
rainwander(金币+2):鼓励积极参与~~~ 2011-01-05 23:40:28
1:蛋白质没有去除干净,所以胶孔中看起来是明亮的。
2:RNA没有完全降解,建议在含有RNA酶处理的溶液中多放置一段时间,或者加大RNA酶的浓度。
3:中间的是DNA,因为DNA在提取过程中由于机械力的作用,一般都会被片段化,所以看起来有拖尾的现象,另外由于不干净所致。

这种DNA不建议做后续的实验,应该将DNA纯化一下,用酚氯仿抽提一下即可。
2楼2011-01-05 22:12:58
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pidou213

木虫 (正式写手)


引用回帖:
Originally posted by xiaoqi708 at 2011-01-05 22:12:58:
1:蛋白质没有去除干净,所以胶孔中看起来是明亮的。
2:RNA没有完全降解,建议在含有RNA酶处理的溶液中多放置一段时间,或者加大RNA酶的浓度。
3:中间的是DNA,因为DNA在提取过程中由于机械力的作用,一般都会 ...

从RNA的角度来看的话,是不是细胞破碎部分是没有问题了吧??

那为什么DNA反而提取不出来呢?还请指点
3楼2011-01-05 22:48:56
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zmw_520

禁虫 (小有名气)


最爱花诗雨(金币+1):鼓励参与交流 2011-01-06 19:07:35
pidou213(金币+1):谢谢啊 2011-01-07 11:11:13
本帖内容被屏蔽

4楼2011-01-06 18:58:53
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