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liuqingrui5金虫 (小有名气)
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为什么同样的PCR条件结果重复不出来呢，P出来一次之后就P不出来了 已有10人参与
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| 为什么同样的PCR条件结果重复不出来呢，P出来一次之后就P不出来了，重复了好几次都不行，超级郁闷 |
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liuqingrui5
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这得看你的需要扩增的基因大小了，不过rTaq确实保真性不高，不建议你用PCR产物做模板P，很有可能就把突变片段给放大了，不过你现在关键是P都P不出来了，用你P的产物来做模板，其他条件和以前P的一样，这实际就是验证你P不出来条带是不是模板的问题~如果你用PCR产物P出来而用原来的模板P不出来那就说明你原来的模板可能出问题啦~并不一定是让你回收连T载体的 |
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11楼2013-12-30 21:50:45
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| 换taq酶，特别是一些easy taq mix ，只是适合于普通的pcr。如果引物需要的条件比较苛刻，那么建议你用LA或者Ex的酶。 |
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6楼2013-12-30 21:00:39
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我也是只有taq酶的，偶尔有一次P出来就像中奖似的。。。真让人发疯，好好总结经验，唉！ [ 发自小木虫客户端 ] |
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