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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 为什么相同的PCR反应条件，在不同的pcr仪上跑的时间不同？？？
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lqlmdyw

铁虫 (初入文坛)

[求助] 为什么相同的PCR反应条件，在不同的pcr仪上跑的时间不同？？？

请教各位大侠，为什么相同的PCR反应条件，在不同的PCR仪上跑的时间会不同？？
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1楼 2012-12-28 09:16:56
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hylee103

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不同仪器内部构造有所不同。
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4楼2012-12-28 09:50:16
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raftsman

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
其实时间分以下及块：
1. 升降温速度，这个一般你能看出来，从94c到56c,每秒降多少度,总共需要多少秒；
2. PCR模块和PCR的契合程度以及材质，PCR模块升温了，要导热至反应液，反应液达到设定的温度才是你要的温度，很大一部分时间花在这；
3. 酶活力和扩增片段不同影响扩增时间
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10楼2012-12-29 09:18:13
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普通回帖

love_st

金虫 (著名写手)
不同仪器升降温速率都不一样
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lqlmdyw
2楼2012-12-28 09:30:36
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lqlmdyw

铁虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by love_st at 2012-12-28 09:30:36
不同仪器升降温速率都不一样

这个我考虑过，请教一下还有没有其他原因？
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3楼2012-12-28 09:34:31
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smzhou791208

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一起不同内部构建的反应时间也是有差异的!
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5楼2012-12-28 09:51:31
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lqlmdyw

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by hylee103 at 2012-12-28 09:50:16
不同仪器内部构造有所不同。

哦
6楼2012-12-28 11:08:08
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lihongbo840427

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
影响PCR程序反应时间的最大因素就是PCR升降温模块的速率，有的机器具有脉冲升温和快速降温的功能，其反应时间必然比其他的机器的时间短。
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7楼2012-12-28 11:31:53
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清风寨

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
PCR是一个狠神奇的东西 有可能同一台仪器同样的反应条件 也p出不一样的结果，上次我用50ul反应体系怎么也p不出来 后来将50ul的反应液分成了25的两管结果就出来了
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冷风过心变热
8楼2012-12-28 13:04:20
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bragren123

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不同仪器设置的升降温速率不一致，你可以到仪器的config文件中查找，然后进行设置
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9楼2012-12-28 13:25:15
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