| 查看: 2509 | 回复: 6 | ||
[求助]
荧光定量PCR与普通PCR产物不一样？
|
|
我做荧光定量PCR,用Oligo6 设计的基因引物，扩增片段长度为91bp, 扩增产物的Tm值79.9。我先用普通PCR进行扩增，扩增条件为94℃,5min; 94℃.30s, 60℃ 30s, 72℃ 30s; 35个循环； 72℃ 10min。扩增的产物电泳检测后发现有200多bp并且只有一条带（具体图没有拍下来）。但是我同样的引物在荧光定量pcr仪上扩增其溶解曲线的Tm值为79℃多一点，基本与我设计的一致。具体图见附件。（其中荧光定量的扩增条件与普通PCR不太一样，我是采用的Takara试剂盒说明书上的两步法）。请问这是怎么一回事？ 本人知道怎么发金币，请版主代劳发给前20位回答问题的虫友。 |
回复此楼» 猜你喜欢
三氯氧磷跟酚
已经有1人回复
-
关于举办2024年化工制药与材料类优秀大学生暑期夏令营的通知
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有260人回复
-
M9培养基浑浊
已经有1人回复
-
面上评审意见-帮忙看一下等级（没上会）
已经有80人回复
-
目的基因序列中有多个引物插入
已经有1人回复
-
链霉亲和素磁珠偶联biotin修饰分子好还是点击反应偶联分子好？
已经有0人回复
-
磁珠法纯化蛋白相比层析柱有什么优势？
已经有3人回复
-
磁固相萃取在药物分析中有潜在应用价值吗？
已经有0人回复
-
关于为什么要在生物传感形成图案的原因求助
已经有0人回复
-
华东理工大学化工学院胡静课题组招博士生和博士后。欢迎有志科研青年加入！
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 荧光定量PCR扩增效率怎么做？？？？我要被逼疯了
已经有17人回复
- 普通PCR的引物能用于荧光定量PCR吗？
已经有39人回复
- 荧光定量PCR cDNA怎么定量啊？
已经有12人回复
- RNA出现降解，还能做后面的荧光定量PCR吗？
已经有22人回复
- 荧光定量PCR
已经有8人回复
- 【求助/交流】荧光定量PCR与半定量的RT－PCR在设计引物时有什么区别？
已经有8人回复
- 【求助/交流】荧光定量PCR中用的 SRBY Green I与电泳上用的是一样的吗？还是不同类型�
已经有3人回复
- 【求助/交流】荧光定量pcr求助
已经有11人回复
- 【求助/交流】普通PCR和荧光实时定量PCR为何结果不同？
已经有4人回复
- 【分享】荧光定量PCR简介
已经有13人回复
- 【求助/交流】关于荧光定量PCR的小问题,请高手指点 【问题已解决】
已经有7人回复
- 【求助/交流】荧光定量PCR？
已经有7人回复
- 【分享】荧光定量PCR实验指南（二）
已经有12人回复
- 【分享】荧光定量PCR实验指南（一）
已经有20人回复
- 【求助/交流】荧光定量pcr
已经有11人回复
空谷幽风
金虫 (正式写手)
- MolEPI: 32
- 应助: 13 (小学生)
- 贵宾: 0.05
- 金币: 1106.1
- 散金: 500
- 红花: 13
- 帖子: 615
- 在线: 116.5小时
- 虫号: 714271
- 注册: 2009-03-04
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
2楼2011-07-24 10:06:58
cdl007
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 41
- 应助: 46 (小学生)
- 贵宾: 0.025
- 金币: 2570.6
- 红花: 11
- 帖子: 545
- 在线: 123.1小时
- 虫号: 275133
- 注册: 2006-08-27
- 专业: 肿瘤病因
3楼2011-07-24 10:49:23
cdl007
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 41
- 应助: 46 (小学生)
- 贵宾: 0.025
- 金币: 2570.6
- 红花: 11
- 帖子: 545
- 在线: 123.1小时
- 虫号: 275133
- 注册: 2006-08-27
- 专业: 肿瘤病因
4楼2011-07-24 10:51:35
5楼2011-07-25 20:45:06
w.king124 
金虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 1534.5
- 红花: 1
- 帖子: 601
- 在线: 284.4小时
- 虫号: 527924
- 注册: 2008-03-18
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
6楼2011-08-31 17:54:38
7楼2013-02-25 10:49:42
20