应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » ＰＣＲ仪做连接
101/1返回列表
查看: 2820  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

添翼如虎

新虫 (小有名气)

[交流] ＰＣＲ仪做连接 已有8人参与

弱弱的问一下，用ＰＣＲ仪做连接，16摄氏度过夜，程序怎么设置呀？PCR仪连续开一晚上可以吗？ 小妹这是第一次做克隆，实验室也没人做过，没经验啊
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-09-24 10:45:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

foxcl

铁虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-09-24 14:12:34
我是设１６度，３０min，２４个循环，总１２个小时。
赞一下 回复此楼
2楼2012-09-24 11:16:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

547star

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
rainwander: 金币+2, 鼓励交流 2012-09-24 14:12:41
半导体制冷效率很低，而且容易坏。很多PCR仪器就是因为做连接把半导体制冷片烧坏而不能用的。不建议用PCR仪做低温连接反应。没有低温水浴，用的小泡沫箱做16度水浴密封好放4度冰箱还好些。
赞一下 回复此楼
为什么
3楼2012-09-24 11:28:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小河弯弯07

银虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
scelab: 金币+2, 这也行？！载体和片段分别多大？ 2012-09-24 14:21:20
做连接不用那么长吧？我都是16度2小时啊~
载体pMD18T,片段500-700bp

[ Last edited by 小河弯弯07 on 2012-9-24 at 15:50 ]
赞一下 回复此楼
4楼2012-09-24 14:04:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
amisking: 金币+3, 鼓励新虫发帖交流，欢迎道生物医药区 2012-09-24 21:33:26
可以设定为16度99小时，第二天来了终止程序就可以了。PCR仪一直开着没什么问题。要注意的是一般PCR仪为了防止程序过程中溶液蒸发，是从顶部加热的，预设温度一般是超过100度的。如果做链接，最好不要这么高，如果是可以调的话，弄个室温就行了。
赞一下 回复此楼
5楼2012-09-24 15:35:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

trizol11

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-09-25 16:56:11
直接设置16度，forever保存，可以了。过夜 16小时。时间短连接效果不好
赞一下 回复此楼
任重道远……
6楼2012-09-24 20:34:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

joan198108

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
amisking: 金币+2, 鼓励发帖交流问题。 2012-09-24 21:33:37
看来都是有钱人啊，PCR仪做链接？！一个水浴锅才多钱啊，不行就买个金属浴的小件，再不行就楼上说的大泡沫盒子，装满水调到16℃，胶带密封，重物压紧，或者干脆4℃时间长一些连接。
赞一下 回复此楼
7楼2012-09-24 21:21:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
其实连接条件没那么苛刻，室温过夜也没什么关系。如果是粘性末端，我都是连一两个小时就做转化了。
赞一下 回复此楼
8楼2012-09-25 12:38:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ilyzp

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
PCR过夜运行对机子损伤很大，还是不要这样了，可以放在4度冰箱过夜，或者拿一个保温杯装上冰块和水调一下温度，这个很容易解决的
赞一下 回复此楼
9楼2012-09-27 11:05:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bragren123

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
PCR仪可以做连接，但我一般不建议学生来做，对仪器损伤较大。如要做，要把热盖关掉，不然不利于连接。
赞一下 回复此楼
10楼2012-12-28 13:27:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 学员js0PXt 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +7 图啦图啦 2026-08-24 8/400 2026-08-24 22:00 by maomao_da
[论文投稿] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 0XLacIJUOj8D 2026-08-24 3/150 2026-08-24 21:59 by BZKMTicpDhFj
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 0XLacIJUOj8D 2026-08-24 5/250 2026-08-24 21:51 by BZKMTicpDhFj
[基金申请] 人气不行了 +10 fansofjerry 2026-08-21 10/500 2026-08-24 21:03 by zhanghaozhu
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +21 koalala 2026-08-24 24/1200 2026-08-24 19:25 by 家与远方
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +17 羊腰板 2026-08-21 19/950 2026-08-24 16:52 by iaeyuan
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 21/1050 2026-08-24 14:21 by refreshing11
[基金申请] 朋友圈看到的 +7 wangzilk 2026-08-18 9/450 2026-08-24 10:50 by cmrandy
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +13 大萍1987 2026-08-20 16/800 2026-08-24 10:23 by 太傻了
[基金申请] 放榜前的不淡定 20+4 snowwithsea 2026-08-19 17/850 2026-08-24 10:20 by echo8914667
[基金申请] 科研孤儿太难了 +18 我4大白菜 2026-08-20 19/950 2026-08-24 09:47 by 凯恩广盛催化分�
[基金申请] 明天应该可查了！？ +4 chengyan1220 2026-08-23 4/200 2026-08-24 08:47 by gloomy6159
[基金申请] 今天放榜吗？ +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 明天放榜？ +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭