版块导航: 正在加载中...

客户端APP下载

登录注册

应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

添翼如虎

新虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 155.5
帖子: 65
在线: 17.6小时
虫号: 1810507
注册: 2012-05-11
专业: 微生物生理与生物化学

[交流] ＰＣＲ仪做连接已有8人参与

弱弱的问一下，用ＰＣＲ仪做连接，16摄氏度过夜，程序怎么设置呀？PCR仪连续开一晚上可以吗？小妹这是第一次做克隆，实验室也没人做过，没经验啊

» 猜你喜欢

售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急已经有5人回复
售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急已经有3人回复
售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急已经有5人回复
售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急已经有5人回复
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急已经有3人回复
售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急已经有5人回复
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急已经有6人回复
售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急已经有5人回复
面上意见出来了已经有16人回复
售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急已经有11人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

大家做酶切或者逆转录时pcr仪盖子温度设为多少？已经有9人回复
载体连接pcr片段一直连不上已经有17人回复
连接后转化子PCR出现非特异性的条带已经有10人回复
PCR ，双酶切，连接问题已经有17人回复
为什么不同PCR仪扩增结果不同已经有7人回复
连接转化后菌落PCR验证出现非特异性扩增已经有5人回复
PCR产物与T载体连不上求助已经有29人回复
该选哪个荧光定量PCR仪，ABI的stepone plus 和 Biorad的cfx96，用过的指点一下已经有23人回复
关于PCR产物与pMD 19Tsimple连接的问题已经有19人回复
【求助/交流】国产PCR仪怎么样？已经有9人回复
【求助/交流】pGEM-T Easy载体 T-A 连接为啥没连入PCR产物的菌斑是蓝斑已经有23人回复
【求助/交流】为什么我的PCR产物总是连接不上T载体已经有26人回复
【求助/交流】做连接后的质粒是否可以用来做pcr 已经有10人回复
【求助/交流】连接产物转化后菌落PCR正确，提取的质粒却比空质粒还小？已经有4人回复
【求助/交流】PCR问题求解，2段基因连接已经有13人回复
【求助/交流】连接产物，是否可以直接做PCR模板？已经有17人回复
【求助/交流】pcr,酶切，连接，哪步可以省？已经有13人回复

1楼 2012-09-24 10:45:01

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

MicEPI: 1
应助: 1662 (讲师)
金币: 8693.8
红花: 72
帖子: 3516
在线: 456小时
虫号: 1614001
注册: 2012-02-13
专业: 生物化学

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

其实连接条件没那么苛刻，室温过夜也没什么关系。如果是粘性末端，我都是连一两个小时就做转化了。

8楼2012-09-25 12:38:30

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

查看全部 10 个回答

foxcl

铁虫 (正式写手)

应助: 28 (小学生)
金币: 2025.2
散金: 4
红花: 3
帖子: 359
在线: 60.4小时
虫号: 1257868
注册: 2011-04-07
专业: 微生物生理与生物化学

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
rainwander: 金币+1, 鼓励交流 2012-09-24 14:12:34

我是设１６度，３０min，２４个循环，总１２个小时。

2楼2012-09-24 11:16:23

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

547star

木虫 (著名写手)

MicEPI: 1
应助: 184 (高中生)
金币: 4273
散金: 271
红花: 14
帖子: 1308
在线: 986.6小时
虫号: 67494
注册: 2005-05-07
专业: 系统生物学

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
rainwander: 金币+2, 鼓励交流 2012-09-24 14:12:41

半导体制冷效率很低，而且容易坏。很多PCR仪器就是因为做连接把半导体制冷片烧坏而不能用的。不建议用PCR仪做低温连接反应。没有低温水浴，用的小泡沫箱做16度水浴密封好放4度冰箱还好些。

为什么

3楼2012-09-24 11:28:31

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

小河弯弯07

银虫 (小有名气)

应助: 15 (小学生)
金币: 469.8
散金: 20
红花: 1
帖子: 213
在线: 88.8小时
虫号: 1920611
注册: 2012-08-02
性别: MM
专业: 微生物生态学

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
scelab: 金币+2, 这也行？！载体和片段分别多大？ 2012-09-24 14:21:20

做连接不用那么长吧？我都是16度2小时啊~
载体pMD18T,片段500-700bp

[ Last edited by 小河弯弯07 on 2012-9-24 at 15:50 ]

4楼2012-09-24 14:04:49

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

查看全部 10 个回答

最具人气热帖推荐 [查看全部]		作者	回/看	最后发表

	[找工作] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3	gy1nBQXYQJqL 2026-08-29	5/250	2026-08-29 21:33 by 4qO8zhfjr2AX
	[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3	gy1nBQXYQJqL 2026-08-29	5/250	2026-08-29 21:22 by 4qO8zhfjr2AX
	[论文投稿] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3	gy1nBQXYQJqL 2026-08-29	5/250	2026-08-29 21:11 by 4qO8zhfjr2AX
	[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +6	ASdOkHsho7FD 2026-08-28	7/350	2026-08-29 17:31 by 4FFAWE8HcgUD
	[公派出国] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4	ASdOkHsho7FD 2026-08-28	6/300	2026-08-29 17:30 by 4FFAWE8HcgUD
	[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5	ASdOkHsho7FD 2026-08-28	8/400	2026-08-29 17:22 by 4FFAWE8HcgUD
	[基金申请] 为什么到现在没收到通知？ +4	tannykie 2026-08-29	4/200	2026-08-29 17:14 by lmz0216
	[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3	ASdOkHsho7FD 2026-08-28	4/200	2026-08-29 14:02 by jCd0dEvKHShX
	[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4	ASdOkHsho7FD 2026-08-28	5/250	2026-08-29 11:49 by jCd0dEvKHShX
	[找工作] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4	ASdOkHsho7FD 2026-08-28	6/300	2026-08-29 11:29 by jCd0dEvKHShX
	[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6	ASdOkHsho7FD 2026-08-28	9/450	2026-08-29 11:18 by jCd0dEvKHShX
	[基金申请] 系统查不到 +11	董八千 2026-08-26	11/550	2026-08-28 18:06 by Leogzhya
	[基金申请] 面上合作单位盖章 +5	ssyjh 2026-08-27	5/250	2026-08-27 20:50 by gdfollow
	[基金申请] 基金未中，这种答复是模板吗？ +5	zhaosm1982 2026-08-27	6/300	2026-08-27 16:00 by lfy8008
	[文学芳草园] 梦想 +3	myrtle 2026-08-26	3/150	2026-08-27 10:01 by angelyueyi
	[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7	process2012 2026-08-23	10/500	2026-08-26 19:23 by hmhminy
	[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4	bjdxyxy 2026-08-26	4/200	2026-08-26 13:12 by qingmu1201
	[基金申请] 国际合作可查了，中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18	Ldrop2023 2026-08-26	18/900	2026-08-26 11:15 by cmrandy
	[基金申请] 国合可查了 +3	paperzjh 2026-08-26	3/150	2026-08-26 10:41 by LemmonTr
	[基金申请] 牛来！米来！面来！ +8	beefly 2026-08-26	8/400	2026-08-26 08:37 by xuzhipiao